子宮体癌・卵巣癌におけるAkt2遺伝子の増幅とその臨床病態との関連

子宫内膜癌和卵巢癌中Akt2基因扩增及其与临床病理的关系

• 批准号: 11770957
• 负责人: 山下 博
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770957/
• 关键词: 卵巣癌; AKT2遺伝子; 予後因子

AKT2遺伝子は、シグナル伝達物質に特徴的とされるPHドメインを有する。セリン/スレオニンプロテインキナーゼをコードしている。1995年にBellacosaらは、卵巣癌患者の12%において、この遺伝子の増幅が認められることを報告しており、遺伝子増幅症例においては、臨床予後が悪い傾向が認められるとも述べている。そこで、今回我々は、わが国の卵巣癌患者における、AKT2遺伝子増幅の頻度とその臨床予後とを検討すべく、ドットブロット法を用いた解析を試みた。当院において1992年から1995年までに初回手術を受けた計40例について、パラフィン包理切片より癌部および非癌部組織を削り出し、キシレンによる脱パラフィン後通常のフェノール、クロロホルム、イソアミルアルコールを用いてDNAを抽出した。これらの検体をドットブロット法にてナイロンメンブレンに固定し、AKT2のgenomic fragmentをプローブとしてハイブリダイゼーションを行なった。また、internal controlとして、上皮性悪性腫瘍において遺伝子増幅の報告の無い7c22を用いた。非癌部分をコントロールとし、癌部分のAKT2遺伝子コピー数の多寡につき検討を行なったが、3コピー以上の遺伝子増幅は認められず、わが国においては、卵巣癌の発症にAKT2遺伝子の異常増幅が関与していないと考えられた。来年度は、抗AKT2抗体を用いた免疫染色法により、本遺伝子の発現の多寡につき検討を進めて行く予定である。

Akt2基因具有被认为是信号传感器的特征的pH结构域。它编码丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。 1995年，Bellacosa等人。报道说，该基因在12％的卵巢癌患者中得到了扩增，并且还指出，在基因扩增的情况下，临床结果较差的趋势。因此，我们试图使用DOT印迹来分析日本卵巢癌患者中Akt2基因扩增的频率及其临床预后。从1992年至1995年在我们的医院接受初次手术的40例患者中，从石蜡摄入切片中雕刻出癌性和非癌性组织，并用二甲苯脱蜡后，使用常规的酚类，氯仿，和异糖剂提取DNA。通过点印迹将这些样品固定在尼龙膜上，并使用Akt2的基因组片段作为探针进行杂交。此外，作为一种内部对照，使用了7C22，尚未据报道在上皮恶性肿瘤中具有基因扩增。非癌部分被用作对照，检查了癌症部分Akt2基因的副本数量，但未观察到三个或更多份的基因扩增，在日本，人们认为AKT2基因的异常扩增与卵巢癌的发展有关。明年，我们计划研究使用抗AKT2抗体进行免疫染色表达基因的程度。

项目成果

山下 博 他: "子宮頚部原発神経内分泌癌の3例"日本産科婦人科学会東京地方部会誌. 46. 99-103 (1996)

Hiroshi Yamashita 等：“原发性子宫颈神经内分泌癌三例”日本妇产科学会东京地区分部杂志 46. 99-103 (1996)。

山下博、塚崎克 他: "手術癌法が母体・胎児・新生児に及ぼす影響"周産期医学. 26. 1645-1649 (1996)

Hiroshi Yamashita、Katsu Tsukasaki 等人：“癌症手术方法对母亲、胎儿和新生儿的影响”《围产期医学》26。1645-1649 (1996)

山下博、塚崎克己 他: "保険診療における腫瘍マーカーの使い方"産婦人科の実際. 46. 1447-1452 (1997)

Hiroshi Yamashita、Katsumi Tsukazaki 等：“在保险医疗中使用肿瘤标志物”妇产科实践 46。1447-1452 (1997)。