色素性乾皮症G群モデルマウス系統の特性とXPG遺伝子機能に関する研究

着色性干皮病G组模型小鼠品系特征及XPG基因功能研究

• 批准号: 10780520
• 负责人: 原田 良信
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: National Institute of Radiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780520/
• 关键词: 色素性乾皮症; Xeroderma Pismentosum; XP; G群; ノックアウトマウス; NER; DNA修復; A群; Xeroderma pigmentosum; コケイン

本年度は昨年度に引き続き、XPG/2系統における脳の組織学的解析を試みた。XPG/2系統マウスのノックアウトホモマウス(以下ホモと略す)とコントロールとしての野生型マウス(以下野生型と略す)に対して4%PFA固定を施し、脳重量を測定した後、パラフィン切片を作製し解析した。16日齢のXPG/2ホモマウスは顕著な歩行異常を示した。XPG/2ホモマウスは野生固体に比べ、大脳、小脳共に萎縮が見られるが、小脳の萎縮が顕著であった。また小脳の組織学的観察を行ったところ、プルキンエ細胞およびその樹状突起の変性などが観察された。また顆粒層細胞にアポトーシス細胞の増加を観察した。大脳においては、海馬CA1領域に、アポトーシス細胞の顕著な増加が観察された。これらの結果は、ホモの脳は野生型に比べ質的な変化を起こしていることを示唆するものと考えられ、XPG/2ノックアウト系統はDNA除去修復のみならず、脳神経系の病体モデルとしても有用であることが考えられた。来年度は上記のような変化が、マウスの誕生後いつ起こるのかを確かめるべく、経時的な解析を行う予定である。XPG/3ノックアウト系統とA群XPのモデルマウスであるXPAを交配し、4つ遺伝子がすべてノックアウトアレルになった場合は、その個体はXPG/2系統ホモマウスと同様、生後の成長が著しく不良で、離乳期後に死亡することは昨年度報告したが、今年度個体数を増やし、飼育方法を改良したところ、ダブルノックアウトマウスの約15%は6ヶ月程度生き延びることが判明した。これについても来年度詳細に解析する予定である。

继去年之后，今年我们尝试对 XPG/2 菌株的大脑进行组织学分析。将敲除纯合XPG/2品系小鼠(以下称为纯合型)和作为对照的野生型小鼠(以下称为野生型)用4％PFA固定，测量其脑重量，并制备石蜡切片。并进行了分析。 16 日龄 XPG/2 纯合小鼠表现出明显的步态异常。 XPG/2纯合子小鼠与野生动物相比，大脑和小脑均出现萎缩，但小脑萎缩更为明显。此外，小脑的组织学观察揭示了浦肯野细胞及其树突的变性。我们还观察到颗粒细胞中凋亡细胞的增加。在大脑中，在海马 CA1 区域观察到凋亡细胞显着增加。这些结果表明，与野生型相比，纯合子脑发生了质的变化，并且XPG/2敲除株不仅对于DNA切除修复有用，而且作为脑神经系统的疾病模型也被认为是有用的。明年，我们计划进行时间分析，以确定小鼠出生后上述变化何时发生。如果将XPG/3敲除品系与A组XP的模型小鼠XPA杂交，所有四个基因都成为敲除等位基因，那么个体在出生后将出现明显的生长不良，类似于去年的XPG/2品系纯合小鼠。我们报道过小鼠断奶后死亡，但今年我们增加了小鼠数量并改进了饲养方法，发现大约15%的双敲除小鼠存活了6个月左右。我们计划明年对此进行详细分析。

项目成果

Harada Y.N.et al: "Postnatal growth failure,Short life span and early onset of cellclar senescenceand subseaquent immortalizalin in mice lacky the xeracemapig mentosum group G gene" Moleculor cell biology. 19(3). 2366-2372 (1999)

Harada Y.N.等人：“缺乏 xeracemapig mentosum G 组基因的小鼠出现产后生长障碍、寿命短、细胞早衰和随后的永生化”分子细胞生物学。

Harada Y.-N.et al.: "Postnatal growth failure, short life span and early onset of Celler senescence and subseaent immortalization in mice lacking the Xeroderma Pismentosum group G gene"Moleculer cell biology. 19(3). 2366-2372 (1999)

Harada Y.-N.等人：“缺乏干皮病 G 组基因的小鼠出生后生长障碍、寿命短、细胞衰老和近代永生化提前”分子细胞生物学。