遺伝子ターゲッティング法を用いた色素性乾皮症G群モデルマウス系統の樹立
基因打靶法建立着色性干皮病G组模型小鼠品系
基本信息
- 批准号:08780807
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ヒトの遺伝病である色素性乾皮症G群のマウスホモログであるxpg遺伝子のエクソンに突然変異を起こさせたターゲッティングベクターを用い、変異ESクローンを選択し、キメラマウスを得た。このキメラマウスをC57BL/6マウスと交配し、F1マウスを得た。F1マウスは外見上正常マウスと差異は認められず、またその細胞は紫外線に対し、高感受性にはなっていなかった。次にこのF1マウス同士を交配し、変異xpgマウスをヘテロに持つマウス、すなわち色素性乾皮症G群モデルマウスが誕生した(以下、このマウスをxpg欠損マウスと略す)。xpg欠損マウスは出生時は他の野生型、あるいはヘテロマウスと変わり無く生まれてくるが、その後の成長が著しく悪く、そのすべてが離乳期までに死亡した。産子の体重を計測したところ、xpg欠損マウスの平均体重は生後16日目で、野生型、あるいはヘテロマウスにくらべ2分の1から3分の1であった。死亡時期は生後10日目より23日目まで観察され、そのピークは16から19日目であると考えられた。ヘテロマウスは野生型との差異は観察されず、妊性も正常であると考えられた。次にxpg欠損マウスの胎児の細胞を採集し、紫外線に対する感受性を観察したが、高感受性であった。xpg遺伝子の転写をノーザンブロット法を用いて観察したが、全く発現されたいなかった。xpg欠損マウスの矮小化と離乳前に死亡する原因の1つとして、野生型、あるいはヘテロマウスとの競争、すなわちxpg欠損マウスの授乳行動が野生型、あるいはヘテロマウスによって妨げられていることが考えられた。そこで生後10日目に野生型、あるいはヘテロマウスと考えられるマウスを取り除く実験を行ったが、xpg欠損マウスは離乳前に死亡し、野生型、あるいはテヘロマウスとの競争はなく、それ自身に矮小化と離乳前に死亡する原因があると考えられた。
使用靶向载体来突变XPG基因的外显子,XPG基因的外显子,一种小鼠色素commento g组,人类遗传疾病,并选择了突变的ES克隆以获得嵌合小鼠。用C57BL/6小鼠饲养嵌合小鼠以获得F1小鼠。 F1小鼠显然与正常小鼠没有什么不同,它们的细胞对紫外线不高度敏感。接下来,将F1小鼠交叉以与突变XPG小鼠的异源小鼠,即静脉XPG小鼠,即Xeroderma Pig gult g模型小鼠(以下简称缩写为xeroderma色素沉着小鼠)。 XPG缺陷的小鼠出生时与其他野生型或异性及其媒体一样出生,但随后的生长明显更糟,所有这些都因断奶而死。后代的重量表明,XPG缺陷小鼠的平均体重在出生后16天,野生型或异性小鼠的平均体重为三分之一。从第10天到第23天观察到死亡期,峰值为16至19。接下来,收集了来自XPG缺陷小鼠的胎儿细胞,并观察到它们对紫外线的敏感性,并且非常敏感。使用北印迹观察到XPG基因的转录,但根本没有表达。在XPG缺陷的小鼠中断奶前矮小和死亡的原因之一是,与野生型或异源菌丝的竞争,即野生型或异性及其伴侣阻碍了XPG缺陷小鼠的泌乳行为。因此,在生命的第10天,我们进行了一项实验,以去除被认为是野生型或异性鼠的小鼠,但是缺乏XPG的小鼠在断奶前死亡,并且没有与野生型或Tehero小鼠的竞争,并且认为有自己的垂死和死亡的原因。
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Harada Y.-N.et al.: "Complementary DNA sequence and chromosomal localization of xpg,the mouse countorpart of human repair gene XPG/ERCC5" GENOMICS. 28. 59-65 (1995)
Harada Y.-N.等人:“xpg 的互补 DNA 序列和染色体定位,人类修复基因 XPG/ERCC5 的小鼠对应部分”GENOMICS。
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原田 良信其他文献
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