腫瘍細胞選択的アポトーシスによる内分泌系悪性腫瘍の遺伝子治療法の開発

利用肿瘤细胞选择性凋亡开发内分泌系统恶性肿瘤基因治疗

• 批准号: 09770773
• 负责人: 川上 康
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770773/
• 关键词: 甲状腺癌; 遺伝子治療; FAS

甲状腺癌を対象とした新しい遺伝子治療法の開発を目的として甲状腺細胞特異的にマウスFAS抗原を強制発現させ、ヒトFASを認識せずマウスFASのみ認識する抗マウスFASモノクローナル抗体を用いて正常甲状腺細胞を含め癌原発および転移腫瘍をアポトーシスへ誘導する方法を研究した。ヨード移送チャネル遺伝子のプロモーター領域(ICP)2.3Kbをクローニングして検討したところ、サイログロブリン遺伝子プロモーターよりも甲状腺細胞特異的なプロモーター活性が認められた。そこでICPによりFAS抗原を特異的に発現させ上記の遺伝子治療法を実験動物モデルで検討した。ヒト甲状腺乳頭癌8例、濾胞癌2例、未文化癌2例において上記プロモーター活性を測定したところ、サイログロブリン産生の認められない未文化癌症例を含めた全例でプロモータ活性が認められた。TgPまたはICPとマウスFAS抗原を組み込んだアデノウイルスを作製し、ヒト甲状腺正常組織および甲状腺癌由来の初代培養細胞に導入したところ細胞表面にマウスFAS抗原が発現することを確認した。抗マウスFAS抗体を上記のヒト甲状腺癌細胞由来の培養細胞に添加した結果、アポトーシスが観察された。ヒト甲状腺癌を移植したヌードラットにアデノウイルスを用いて、マウスFAS遺伝子をICをプロモーターとして導入し、抗マウスFAS抗体を投与して、実験動物モデルにおいて腫瘍縮小効果を認めた。また、抗マウスFAS抗体の投与により病理学的、血清生化学的に腫瘍組織以外の臓器に障害は認められなかった。

为了开发针对甲状腺癌的新基因疗法，我们研究了一种迫使专门针对甲状腺细胞的小鼠Fas抗原表达的方法，并诱导原发性癌症和转移性肿瘤，包括正常甲状腺细胞，使用抗小鼠FAS FAS FAS FAS单核抗体，这些抗凋亡是凋亡的。当对碘转移通道基因的启动子区域（ICP）克隆并检查时，发现比甲状腺球蛋白基因启动子特异性启动子活性特异性。因此，FAS抗原是使用ICP特异性表达的，并在实验动物模型中检查了上述基因治疗方法。当在8例乳头状人甲状腺癌，2例卵泡癌和2例不培养癌病例中测量启动子活性时，在所有病例中均观察到启动子活性，包括未产生甲状腺球蛋白的不培养癌病例。产生了掺入TGP或ICP和小鼠FAS抗原的腺病毒，并引入源自人甲状腺正常组织和甲状腺癌的原代培养细胞，并证实小鼠FAS抗原在细胞表面表达。将抗小鼠FAS抗体添加到源自上述人类甲状腺癌细胞的培养细胞中，并观察到凋亡。使用腺病毒对用人甲状腺癌移植的裸大鼠，使用IC作为启动子引入小鼠FAS基因，并施用抗小鼠FAS抗体，并在实验动物模型中观察到肿瘤减少作用。此外，抗小鼠FAS抗体的施用没有对肿瘤组织以外的器官的病理或血清生化损害。

项目成果

Yasushi Kawakami: "Anti-vascular endothelial growth factor antibody improved the Surviral rate of corneal graft transp1antation." Transplantation. 76(in press). (1999)

Yasushi Kawakami：“抗血管内皮生长因子抗体提高了角膜移植的存活率。”

Y.Kawakami: "Ocular vascular endothelial growth factor levels in diabetic rats are clerated before observable retinal proliteratie change" Diabetologion. 40. 726-730 (1997)

Y.Kawakami：“糖尿病大鼠的眼部血管内皮生长因子水平在可观察到的视网膜增生变化之前就已达到饱和”Diabetologion。

Yasushi Kawakami: "Intracellular fatty acid regulate obece gene expression in 3T3-adypocyte." J.Biol.Chem.273. 27041-27049 (1998)

Yasushi Kawakami：“细胞内脂肪酸调节 3T3 脂肪细胞中的 obece 基因表达。”

Y.Kawakami: "Type II alvedar epithelial cells in lung express peceptor for RAGE gene" (1997)

Y.Kawakami：“肺中 II 型肺泡上皮细胞表达 RAGE 基因的感受器”（1997 年）