敗血症に伴う代謝系の変化-遺伝子制御およびP450発現の変化

与脓毒症相关的代谢变化——基因调控和 P450 表达的变化

基本信息

批准号：
08771222
负责人：
小田裕
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771222/
关键词：
敗血症チトクロームP450 mRNA

项目摘要

敗血症に伴う代謝異常に関与するチトクロームP450(P450)をmRNAレベルで明かにするとともに、これに最も深く関与する炎症メディエーターを求める目的で実験を行った。これに先立ち、肝における代謝酵素の誘導が的確に行われることを確認する目的で、8-9週齢のSprague-Dawley系雄ラットを用いてフェノバルビタールによる酵素誘導を確認したところ、代表的な分子種であるCYP3A2およびCYP2B1が誘導されていることが判明した。またこれらのラットより得られたミクロゾームは、標準物質であるリドカインの代謝活性が亢進していることが判明した。そこで次にE.Coliより得られたlipopolysaccharideを腹腔内投与して敗血症モデルを作成した。このラットにおいては体温上昇、血漿中のc-reacting protein濃度の上昇が認められた。肝よりミクロゾームを作成し、このミクロゾームに対してウエスタンブロット法により抗450抗体と反応させて代表的なP450分子種であるCYP1A、2B、2C、2Dおよび3Aの含量を求めたところ、正常ラットに比べてこれらP450の含量が有意に変化していた。次にいずれの炎症メディエーターによってP450の変化が生じているのかを明らかにする目的で、これらのラットにmurine recombinant IL-1、IL-6、TNF-αを投与した後に経時的に断頭屠殺し、上記の方法に従ってP450量およびmRNA量を定量すした。しかし特定の炎症メディエーターとP450との関係は明らかにならず、これらの炎症メディエーターとはさらに別の因子が関与している可能性が示唆された。

我们进行了实验，以在 mRNA 水平上阐明与脓毒症相关的代谢异常有关的细胞色素 P450 (P450)，并确定与此密切相关的炎症介质。在此之前，为了确认肝脏中的代谢酶的诱导被准确地进行，使用8-9周龄的Sprague-Dawley雄性大鼠确认了苯巴比妥的酶诱导，发现了分子种类CYP3A2和CYP2B1。被诱导。还发现，从这些大鼠获得的微粒体中，标准物质利多卡因的代谢活性得到增强。接下来，我们通过腹腔内施用从大肠杆菌中获得的脂多糖来创建脓毒症模型。在该大鼠中，观察到体温和血浆 C 反应蛋白浓度升高。从肝脏制备微粒体，通过Western blotting将微粒体与抗450抗体反应，测定代表性P450分子种类CYP1A、2B、2C、2D和3A的含量，比较这些P450的含量。显着改变。接下来，为了弄清楚是哪种炎症介质引起P450的变化，对这些大鼠施用鼠重组体IL-1、IL-6和TNF-α，然后断头处死，根据时间对P450量和mRNA量进行定量。至上述方法。然而，特定炎症介质与P450之间的关系尚未阐明，这表明可能涉及这些炎症介质以外的因素。