OLプロトカドヘリンの発現と機能の解析

OL原钙粘蛋白的表达及功能分析

基本信息

批准号：
12780563
负责人：
平野伸二
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780563/
关键词：
プロトカドヘリンカドヘリン細胞接着分子神経回路

项目摘要

プロトカドヘリンは、神経系に特異的に発現する細胞接着分子である。特に、OLプロトカドヘリンでは嗅覚系や大脳辺縁系で特徴的な発現がみられ、これらの神経回路形成にかかわっているのではないかと想像されている。プロトカドヘリンについて、本年度は以下の研究を行った。まず、プロトカドヘリン2Aの発現をマウスの脳で調べた。そして、生後脳ではごく限られた神経核と上衣細胞などで特徴的に発現がみられ、成体脳ではプルキンエ細胞に特異的に発現していることを明らかにした。つぎに、マウスの生後の脳においてOLプロトカドヘリンの発現を免疫組織化学を用いて詳細に解析した。その結果LOT-st pathwayなど局所的な神経回路にそって蛋白が分布していることがわかり、このような神経回路形成に関わっていることが示唆された。また、ストリオソームなどでの局在から、これが細胞選別などに関与していることが示唆された。また、前年から引き続いて行っているノックアウトマウス作製については、欠失変異となるようなコンストラクトを作製し、ES細胞を樹立した。今後は、これをインジェクションして、変異マウスを作製するところである。トランスジェニックマウスについては、Cre-lox PによってOLプロトカドヘリンが制御されるコンストラクトを作製した。これをインジェクションし、現在数匹のトランスジェニックマウスが得られている。今後は、実際にOLプロトカドヘリンが過剰に発現するかを検討する予定である。

原钙粘蛋白是一种在神经系统中特异性表达的细胞粘附分子。特别是，OL原钙粘蛋白在嗅觉系统和边缘系统中表现出特征性表达，并且被认为参与这些神经回路的形成。今年，我们对原钙粘蛋白进行了以下研究。首先，检查了小鼠大脑中原钙粘蛋白 2A 的表达。他们发现，在出生后的大脑中，它的特征性表达在非常有限的神经元核和室管膜细胞中，而在成年大脑中，它特异地在浦肯野细胞中表达。接下来，我们使用免疫组织化学详细分析了出生后小鼠大脑中 OL 原钙粘蛋白的表达。结果发现，该蛋白沿着 LOT-st 通路等局部神经回路分布，表明它参与了此类神经回路的形成。此外，它在纹状体内的定位表明它参与细胞分选。此外，关于从去年开始进行的基因敲除小鼠的生产，制作了产生缺失突变的构建体并建立了ES细胞。未来，我们将通过注射这种物质来创造突变小鼠。对于转基因小鼠，我们创建了一种构建体，其中 OL 原钙粘蛋白受 Cre-lox P 调节。通过注射这种物质，现在已经获得了几只转基因小鼠。未来，我们计划检查 OL 原钙粘蛋白是否确实过度表达。