細胞接着分子プロトカドヘリンの生理機能の解析

细胞粘附分子原钙粘蛋白的生理功能分析

基本信息

批准号：
10780468
负责人：
平野伸二
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

OLプロトカドヘリンは、カドヘリンファミリーに属する細胞接着分子で、発生初期には鰓丘などで発現し、発生後期には臭覚系や大脳辺縁系などの特定の神経系で発現している。発現パターンから、顔面発生や神経回路形成に関与していることが予想されるが、その実証はされていない。本研究では、OLプロトカドヘリンの生体内での機能を解明するためにトランスジェニックマウスの作製を試みた。OLプロトカドヘリンのcDNAをRSVプロモーターにつなぎ、受精卵に導入した。その結果4匹のトランスジェニックマウスが生まれた。マウスは、特に大きな異常は見られなかった。タンパクの発現を調べてみると、心臓、肺、腸の筋層など限られた部位で弱い発現が見られた。分子量も内在性のものより小さくなっていた。腸での末梢神経に異常がないかニューロフィラメントの抗体で調べてみても、特に変化は見られなかった。胎仔期の発現を調べると、肢芽や鰓丘などの外胚葉の一部で異所的発現がみられるものもあったが、形態的な異常は見られなかった。一方、プロトカドヘリン2ファミリーに属する新たなプロトカドヘリンのクローニングを行った。その発現を調べてみると、発現時期や相対強度は違うが、小脳や臭覚系でOLプロトカドヘリンと非常に良く似た発現をしていることが明らかになった。従って、種々のプロトカドヘリンは、神経組織でお互いにオーバーラップしながら発現をし、機能していることが示唆された。

OL原钙粘着蛋白是属于钙粘蛋白家族的细胞粘附分子，在吉拉斯锥的发育初期和在特定神经系统（例如气味系统和缘缘系统）的发育晚期中表达。表达模式表明它参与了面部发育和神经回路的形成，但尚未证明。在这项研究中，我们试图创建转基因小鼠以阐明OL原钙粘着蛋白的体内功能。 OL原粘蛋白的cDNA连接到RSV启动子，并引入受精卵。结果是四只转基因小鼠。小鼠没有特别明显的异常。在检查蛋白质表达时，在有限的区域（例如心脏，肺部和肠肌层）中发现了弱表达。分子量也小于内源性。当检查神经丝抗体是否有肠外周神经异常的异常时，找不到特殊的变化。在检查胎儿表达时，在某些外胚层中观察到一些异位表达，例如肢体芽和gillus收缩器，但未观察到形态异常。同时，克隆了属于原钙粘着蛋白2家族的一种新的原始钙粘着蛋白。在检查其表达时，表明尽管表达和相对强度的时机有所不同，但它与小脑和气形系统中的OL原钙粘着蛋白非常相似。因此，建议在具有重叠表达和功能的神经组织中表达各种原始钙粘着蛋白。