単球と血管内皮の相互作用における細胞内シグナル伝達機序

单核细胞与血管内皮相互作用的细胞内信号传导机制

基本信息

批准号：
10770316
负责人：
高橋将文
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

動脈硬化の発症仮説である障害反応説(response to injury hypothesis)によれば単球と血管内皮の相互作用はその発症初期における最も重要な段階である.今回、我々は、この単球と血管内皮の相互作用により細胞外マトリックスの消化に重要なマトリックスメタロプロテナーゼ-1(MMP-1)と強力な血管拡張物質であるアドレノメデュリン(AM)が産生されることを見いだし、その産生機序について検討した.ヒト単球とヒト臍帯静脈由来血管内皮細胞(HUVEC)の共培養により、単球とHUVECの両細胞においてMMP-1の発現、産生が誘導された.このMMP-1産生は炎症性サイトカインであるIL-1βおよびTNFαの中和抗体、あるいはチロシンキナーゼ阻害剤であるherbimycinAやMEK阻害剤であるPD98059によって有意に抑制された.また、この相互作用によりチロシンキナーゼc-SrcとMAPキナーゼ(ERK1/2)の活性化が認められた.これらよりこのMMP-1産生はIL-1βおよびTNFαといった液性因子と、細胞内シグナル伝達経路としてチロシンキナーゼおよびMAPキナーゼを介していることが示された.一方、この相互作用はAMの発現、産生も誘導するが、ルシフェラーゼアッセイおよび細胞の膜分画を抽出しての検討から、このAMは主としてHUVECから産生されることを明らかとした.また、このAM産生はMMP-1と同様に一部炎症性サイトカインであるIL-1を介していた.今後、さらに詳細なシグナル伝達経路や、以前より報告してきたこの相互作用による接着分子やサイトカインの発現が同様のシグナル伝達経路を介しているかどうかを検討し、実際にこのシグナル経路を阻害することにより動脈硬化の形成を抑制することができるかを検討する予定である.

损伤反应理论是动脉硬化发展的假设。根据假设），单核细胞和血管内皮之间的相互作用是疾病发展早期最重要的步骤。在这项研究中，我们证明单核细胞和血管内皮之间的这种相互作用促进基质金属化，这对于消化我们发现蛋白酶-1（MMP-1）和肾上腺髓质素（AM）是一种有效的血管扩张剂，并研究了其产生机制。人单核细胞和人脐静脉来源的血液血管内皮细胞 (HUVEC) 的共培养诱导单核细胞和 HUVEC 细胞中 MMP-1 的表达和产生，这种 MMP-1 的产生中和了炎症细胞因子 IL-1β 和 TNFα，并被抗体、酪氨酸激酶显着抑制。抑制剂除草霉素 A 和 MEK 抑制剂 PD98059 这种相互作用还抑制酪氨酸激酶 c-Src 和 MAP 激酶。这些结果表明，MMP-1的产生是由IL-1β和TNFα等体液因子以及酪氨酸激酶和MAP激酶作为细胞内信号转导途径介导的，另一方面，这种相互作用也诱导AM的表达和产生。荧光素酶测定和提取的细胞膜组分的检查表明，该 AM 主要由 HUVEC 产生。此外，与MMP-1一样，这种AM的产生部分是由炎症细胞因子IL-1介导的。我们将继续研究更详细的信号转导途径和这种相互作用，我们计划检查之前已经报道过的表达。粘附分子和细胞因子的这种作用是由类似的信号转导途径介导的，以及是否实际上可以通过抑制该信号途径来抑制动脉硬化的形成。