哺乳類における容量性Ca^<2+>流入機構の解明

哺乳动物电容性Ca^2+内流机制的阐明

• 批准号: 10770046
• 负责人: 村山 尚
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770046/
• 关键词: 容量性カルシウム流入; transient receptor potential

容量性Ca^<2+>流入(Capacitative Ca^<2+> entry;CCE)機構は細胞内Ca^<2+>ストアのCa^<2+>が減少または枯渇した場合に起こる細胞外からのCa^<2+>流入であり,細胞膜の受容体刺激およびthapsigargin,cyclopiazonic acidなどのCa^<2+>ポンプ阻害薬により引き起こされることが多くの細胞で観察されている.しかし,この機構の本質については不明な点が多く残されている.最近の研究からtransient receptor potential(trp)ファミリーと呼ばれる一群のタンパク質がCCEチャネルの本体であることが提唱されている.本研究ではCCE機構を解明する糸口としてtrpに対する特異的な抗体を作成し,哺乳類細胞におけるtrpの発現とその基本的な性質を明らかにすることを目的とした.trpには現在までに7種類のアイソフォームが知られている.昨年度の研究において全てのアイソフォームで高く保存されている領域(trp-c)および各アイソフォーム特異的な領域(trp-s)について特異的抗体を得た.本年度はこれらの抗体を用いて種々の組織におけるtrpの発現パターンを観察した.抗trp-cは骨格筋,心筋,平滑筋などの各種筋組織および神経細胞の細胞膜を特異的に染色した.その染色強度は組織間で異なっていた.骨格筋および心筋では細胞膜に加えてT管も染色されていた.一方,trp-sは各アイソフォーム特異的な組織分布を示した.以上の結果はtrpタンパク質が組織特異的に発現し,それぞれの組織で独自の機能をもつ可能性を示唆するものである.

电容ca^<2+>输入; cce）机制是细胞外Ca^<2+>涌入，当细胞内Ca^<2+>存储中的Ca^<2+>储存量时发生，并且已经降低或耗尽，并且已经在许多细胞中观察到许多细胞，这些细胞在许多细胞中是由细胞膜刺激和ca^<2+> pupligia的酸和pupligiasonic puplingin和thaps -pumigia的酸和catigia的caciigiia的许多细胞所引起的。但是，关于这种机制的性质，许多不清楚的观点仍然存在。最近的研究表明了瞬时受体。已经提出，一组称为电势（TRP）家族的蛋白质是CCE通道的主体。这项研究旨在创建针对TRP的特定抗体，以阐明CCE机制，并阐明在哺乳动物细胞及其基本特性中TRP的表达。迄今已知七种类型的同工型。在去年的研究中，在所有同工型（TRP-C）中高度保守的区域，并且在每个同工型特异性区域（TRP-S）特定抗体中均得到了特定的抗体。在今年，这些抗体被用来观察各种组织中TRP的表达模式。抗TRP-C特异性染色了各种肌肉组织的细胞膜，例如骨骼肌，心肌和平滑肌以及神经元。组织之间的染色强度有所不同。除了骨骼肌和心肌中的细胞膜外，还对T管进行了染色。同时，TRP-S显示针对每个同工型特异的组织分布。上面的结果表明，TRP蛋白是组织特异性的，并且在每个组织中可能具有独特的功能。

项目成果

Murayama,T.: "Further Characterization of the type 3 ryanodine receptor (RyR3) purified from rabbit diaphragm"Journal of Biological Chemistry. 274. 17297-17300 (1999)

Murayama,T.：“从兔隔膜中纯化的 3 型兰尼碱受体 (RyR3) 的进一步表征”生物化学杂志。

Murayama,T.: "Role of Mg^<2+> in C^<2+> Induced C^<2+> Release through Ryanodine Recetors of Frog Skeletal Muscle:Modulations by Adenine Nucleotides and Caffeine."Biophysical Journal. 78. in press (2000)

Murayama,T.：“Mg^<2> 在 C^<2> 诱导 C^<2> 通过青蛙骨骼肌 Ryanodine 受体释放中的作用：腺嘌呤核苷酸和咖啡因的调节。”生物物理学杂志。

村山 尚: "特異的抗体による哺乳類横隔膜の3型リアノジン受容体(RyR3)の精製およびその性質の検討" 日本薬理学雑誌. 112. 65P (1998)

Takashi Murayama：“使用特异性抗体纯化哺乳动物隔膜的 3 型兰尼碱受体 (RyR3) 并检查其特性”《日本药理学杂志》112. 65P (1998)。

Murayama,T.: "Effects of caffeine and Mg^<2+> on the Ca^<2+> activation and inactivation sites of ryanodine receptor" Japanese Journal of Pharmacology. 76. 201P (1998)

Murayama,T.：“咖啡因和Mg^2>对兰尼碱受体Ca^2激活和失活位点的影响”日本药理学杂志。

Kurebayashi,N.: "Role of Mg^<2+> in Ca^<2+> Induced Ca^<2+> Release through Ryanodine Receptors of Frog Skeletal Muscle in situ"Biophysical Journal. 78. 371A (2000)

Kurebayashi,N.：“Mg^<2> 在 Ca^<2> 中的作用通过青蛙骨骼肌原位的 Ryanodine 受体诱导 Ca^<2> 释放”生物物理学杂志。