スギ花粉症に対する経口免疫寛容機序の解明と新規創薬標的分子の探索

雪松花粉病口服免疫耐受机制的阐明及新药物靶分子的寻找

基本信息

批准号：
19K09912
负责人：
村上大輔
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度はスギ抗原‐ガラクトマンナン複合体を用いた経口免疫療法のスギ花粉症予防モデルの作成のため、まずOVAを用いる喘息マウスモデルの系を用いて経口免疫療法の予防効果の確認を行った。マウスは6-8週齢メスのBALB/cを用い、0から4日目および7から11日目に、OVA、コントロールとしてPBSを1日1回経胃投与した。14日目と21日目にOVA 10μgとAlum 1mgを腹腔内投与して感作し、最後に28-31日目に25μg OVAを鼻腔内投与して炎症を惹起させた。その後、24時間後に血清を回収し、OVA特異的抗体をELISAで測定、BALF中の各種細胞数、炎症性のサイトカインと肺組織の解析を行った。血清中のOVA特異的IgEはコントロールと比較し、OVA経口投与群で有意に低下し、またBALF中の総細胞数、好中球数、好酸球数、炎症性のサイトカイン（IL-4、IL-5、IL-13）も同様にコントロールと比較し、OVA経口投与群で有意に低下した。この結果より、感作前にOVAを経口投与することにより、喘息モデルマウスの抗原特異的IgEの低下と気道炎症の惹起が予防されることが明らかとなった。今後、引き続きこの系を応用し、抗原をOVAからスギ抗原またはスギ抗原‐ガラクトマンナン複合体へ変更し、経口免疫療法の花粉症予防モデルの系を作成し、確立する方針である。さらに前年度引き続いてスギ抗原でのアナフィラキシーショックモデルの確立とスギ抗原‐ガラクトマンナン複合体を用いてアナフィラキシーショックが抑制されるか確認を行う予定である。またスギ抗原またはスギ抗原‐ガラクトマンナン複合体を腹腔内に複数回投与することでスギ抗原と比較してスギ抗原‐ガラクトマンナン複合体投与において抗原特異的 IgEが抑制されるか検討を行う。

在今年，为了使用口服抗原 - 半乳糖量复合物为口服免疫疗法创建预防模型，我们首先使用使用OVA的哮喘小鼠模型系统证实了口服免疫疗法的预防作用。小鼠是6-8周大的女性BALB/C，胃肠道OVA和PBS作为对照，每天在第0至4和7至11天。在第14天和21天，10μg的OVA和1 mg的明矾被腹膜内施用，以诱导炎症，最后25μgOva in Interanter in Interanaiss in Interanaiss in in Intananassy in 28-11，in-catement in 28-11，均为28-11。之后，24小时后收集血清，通过ELISA测量OVA特异性抗体，并对BALF，炎症细胞因子和肺组织进行各种细胞计数分析。 OVA组的口服OVA组的血清OVA特异性IgE显着降低，此外，与OVA组相比，OVA组的总细胞计数，中性粒细胞计数，嗜酸性细胞计数和炎症细胞因子（IL-4，IL-5，IL-13）在OVA组中相似地显着减少。这些结果表明，在敏化之前口服OVA防止抗原特异性IgE的降低和哮喘模型小鼠气道炎症的诱导。该计划将在将来继续应用该系统，将抗原从OVA更改为Cedar抗原或Cedar抗原 - 甲乳丹南综合体，并创建和建立用于预防干草热模型的口服免疫疗法的系统。此外，在上一年之后，我们计划建立使用雪松抗原的过敏性休克模型，并确认使用雪松抗原 - 甲乳酰胺植物复合物是否抑制过敏性休克。此外，当将雪松抗原特异性IgE抑制雪松抗原或雪松抗原 - 半乳糖量复合物的多次施用时，当雪松抗原特异性IgE与雪松抗原抗原复合物进行比较。