Development of gene-modified head and neck squamous cell carcinoma model mouse

基因修饰头颈鳞状细胞癌模型小鼠的研制

基本信息

批准号：
19K09893
负责人：
伊勢桃子
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

頭頸部扁平上皮癌（HNSCC）では飲酒、喫煙、ヒト乳頭腫ウイルス感染などにより複数の遺伝子変異が蓄積し、複雑かつ不均質な病態を呈するためか、分子レベルでの発症機構は完全には解明されていない。HNSCCと同様に複雑かつ不均質な遺伝子変異で発症する肺小細胞癌を含め、様々な領域において遺伝子改変マウスを用いた発癌モデル（Genetically engineered mouse models：GEMM）が報告されており、頭頸部領域においても、実臨床に即した悪性度の高い腫瘍を再現性を持って発症させ、遺伝子変異が腫瘍の表現型に及ぼす影響を研究するためには、GEMMが必須であると考える。また安定したGEMMの作製ができたあかつきには抗癌剤を投与することで治療抵抗性に関しての機能解析も行うことができると考えている。場合には動物実験を始めるにあたって必要となる各申請を行い全て承認されている。p53 KOマウスに対するGenotypingのプロトコル設定が完了し、交配に使用できる個体を選別できたため、KO群(hetero, homo)とwild type群のマウス作製を業者に委託し作製開始している。また評価(免疫染色)に用いる抗体(p53, CK14, Ki67など)の条件検討は終了している。また臨床検体を用いた免疫染色による発現タンパク解析についても同時に進めており、臨床検体から薄切切片の作製を随時行っている。

头颈鳞状细胞癌（HNSCC）在分子水平上的发病机制尚未完全阐明，可能是由于饮酒、吸烟、人乳头瘤病毒感染等多种基因突变积累，导致复杂异质性。病理学未完成。基因工程小鼠模型（GEMM）已在包括小细胞肺癌在内的各个领域得到报道，小细胞肺癌是由类似于 HNSCC 的复杂和异质基因突变引起的，我们相信 GEMM 对于可重复开发适合临床实践的高度恶性肿瘤至关重要。并研究基因突变对肿瘤表型的影响。此外，一旦产生稳定的GEMM，我们相信通过施用抗癌药物，将有可能对治疗耐药性进行功能分析。在某些情况下，已经提交了开始动物实验所需的申请，并且全部已获得批准。由于我们已经完成了p53 KO小鼠的基因分型方案设置并选择了可用于繁殖的个体，因此我们将KO（异型、同型）和野生型小鼠的生产外包给供应商并开始生产。此外，用于评价（免疫染色）的抗体（p53、CK14、Ki67等）的条件的考虑已经完成。同时，我们也在利用临床标本进行免疫染色分析表达蛋白，并不断制备临床标本的薄片。