p53遺伝子欠失マウスを用いた口腔癌発症機序の解析

p53基因缺失小鼠分析口腔癌发病机制

基本信息

批准号：
09877397
负责人：
南雲正男
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877397/
关键词：
p53 遺伝子欠失マウス口腔粘膜上皮細胞周期 4NQO p21 c-myc c-fos G1期

项目摘要

p53遺伝子欠失C57BL/6マウス(p53^<-/->マウス)および正常C57BL/6マウスの口腔粘膜上皮細胞を用い、主として細胞周期制御機構の面から発癌機序を解析し、以下のような結果が得られた。1 p53^<-/->マウスから採取した口腔粘膜上皮細胞は、正常マウスのそれと比べて増殖能が高く、かつ培養可能期間が長かった。ただし、両者には形態学的な違いはみられなかった。2 培養細胞にEGF,IL-1αなどの成長因子を添加すると、p53^<-/->マウス由来の口腔粘膜上皮細胞の増殖速度が正常マウス由来のものと比較して有意に律速された。3 フローサイトメトリーによって細胞周期を検討したところ、p53^<-/->マウスの口腔粘膜上皮細胞では成長因子の添加によりG1期が短縮しており、G1停止が起こりにくくなっていることが判明した。4 p53^<-/->マウスの舌に発癌物質である4NQOを7日間塗布した後、c-myc,c-fosmRNAの発現を検討したところ、4NQO処理によってc-mycmRMの発現はp53^<-/->マウスおよび正常マウスいずれにおいても増強された。一方、c-fosmRNAの発現は、p53^<-/->マウスで抑制され、正常マウスでは変化がみられなかった。5 4NQOで処理した口腔粘膜上皮では、p21がp53依存性に発現が誘導されたが、p57の発現はp53非依存性であった。以上の結果から、口腔粘膜の癌化にはp53が関与する経路とp53非依存性の経路の異常の両方が関与している可能性が示唆された。

我们利用p53基因缺陷的C57BL/6小鼠（p53^-/->小鼠）和正常C57BL/6小鼠的口腔粘膜上皮细胞，主要从细胞周期控制机制的角度分析其致癌机制，如下。结果得到了。 1 p53^-/-小鼠口腔粘膜上皮细胞比正常小鼠具有更高的增殖能力和更长的培养期。然而，两者之间没有观察到形态差异。 2 当向培养细胞中添加EGF和IL-1α等生长因子时，与正常小鼠相比，p53^-/-小鼠来源的口腔粘膜上皮细胞的增殖速率明显受到限制。 3 通过流式细胞术检查细胞周期，发现添加生长因子缩短了p53^-/-小鼠口腔粘膜上皮细胞的G1期，使得G1期停滞不太可能发生。 4 将致癌物质4NQO涂抹于p53^</-/->小鼠的舌头7天后，我们检测了c-myc和c-fos mRNA的表达。我们发现4NQO处理降低了c-mycmRM的表达p53^</-/-> -/->在小鼠和正常小鼠中均得到增强。另一方面，p53^-/-小鼠中c-fosmRNA表达受到抑制，而正常小鼠中未观察到变化。在用54NQO处理的口腔粘膜上皮中，p21表达以p53依赖性方式被诱导，但p57表达不依赖于p53。上述结果提示p53相关和p53非依赖性途径的异常可能参与口腔粘膜的癌变。