インスリン様成長因子等による側鎖型オキシステロール産生調節を介した新規情報伝達

通过胰岛素样生长因子等调节侧链氧甾醇产生的新信息传输。

基本信息

批准号：
20K07314
负责人：
杉本博之
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

コレステロールは炭化水素鎖が酵素によりヒドロキシル化を受けると生理活性を有する側鎖型オキシステロールに代謝される。NIH3T3細胞に側鎖型オキシステロールの１つである24S-ヒドロキシコレステロール(24S-OHC)を産生するCytochrome P450 46a1 (CYP46a1)が発現している事を見出した。この酵素の転写はfetal bovine serum(FBS)添加により抑制され、FBS中の本転写抑制因子を逆相HPLC等のカラムにより部分精製し質量分析装置を用いて同定したところインスリン様成長因子-II(IGF-II)であることをつきとめた。この結果はBBA-MCBL 2022、に掲載となった。脳内のコレステロール代謝はBBBにより外界からは仕切られている。このためBBBを通過できるオキシステロール産生により脳内コレステロール量は制御されている。脳内のコレステロール代謝の異常はアルツハイマー病にも関与することから、これまでの研究結果が脳内の細胞にも共通するのか否か脳由来のヒトGlioblastoma 細胞(T98G細胞)を用いて確認した。FBSによる転写抑制の結果はNIH3T3細胞と同じであったがIGF-IIによって転写が抑制されなかったことから、他の因子をFBS中からの同定を試みた。部分精製から質量分析装置によりFetuin-Bであることが同定された。市販のFetuin-Bでも転写抑制が認められた。Fetuin-Bはアルツハイマー病にも関与することが知られている。またマウスNeuroblastoma細胞(N2A細胞)ではFBSによCYP46a1の転写は亢進することが認められ他の細胞とは異なることが示唆された。

当胆固醇的烃链经过酶的羟基化后，代谢成具有生理活性的侧链氧甾醇。我们发现细胞色素 P450 46a1 (CYP46a1) 在 NIH3T3 细胞中表达，它产生 24S-羟基胆固醇 (24S-OHC)（一种侧链氧甾醇）。通过添加胎牛血清（FBS）来抑制该酶的转录，并且使用反相HPLC等柱部分纯化FBS中的转录阻遏物，并使用质谱仪进行鉴定。该成果发表在 BBA-MCBL 2022 上。大脑中的胆固醇代谢通过血脑屏障与外界分开。因此，大脑中胆固醇的含量是由可以穿过血脑屏障的氧甾醇的产生来控制的。由于大脑中胆固醇代谢异常也与阿尔茨海默病有关，因此我们使用脑源性人胶质母细胞瘤细胞（T98G细胞）来确认先前研究的结果是否也适用于大脑中的细胞。 FBS 转录抑制的结果与 NIH3T3 细胞相同，但 IGF-II 不抑制转录，因此我们尝试鉴定 FBS 中的其他因子。部分纯化后，使用质谱仪鉴定为胎球蛋白-B。市售胎球蛋白-B 也观察到转录抑制。还已知胎球蛋白-B 与阿尔茨海默病有关。此外，在小鼠神经母细胞瘤细胞（N2A细胞）中，发现FBS增强了CYP46a1的转录，这表明它与其他细胞中的转录不同。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Imaging of lysophosphatidylcholine in an induced pluripotent stem cell-derived endothelial cell network

诱导多能干细胞衍生的内皮细胞网络中溶血磷脂酰胆碱的成像

DOI：
10.1016/j.reth.2020.03.007
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
4.3
作者：
Shimizu Yasuo;Nakamura Yusuke;Horibata Yasuhiro;Fujimaki Mio;Hayashi Keitaro;Uchida Nobuhiko;Morita Hiroko;Arai Ryo;Chibana Kazuyuki;Takemasa Akihiro;Sugimoto Hiroyuki
通讯作者：
Sugimoto Hiroyuki

The phosphatidylcholine transfer protein StarD7 is important for myogenic differentiation in mouse myoblast C2C12 cells and human primary skeletal myoblasts.

磷脂酰胆碱转移蛋白 StarD7 对于小鼠成肌细胞 C2C12 细胞和人原代骨骼肌成肌细胞的肌原分化非常重要。

DOI：
10.1038/s41598-020-59444-y
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
4.6
作者：
Horibata Y; Mitsuhashi S; Shimizu H; Maejima S; Sakamoto H; Aoyama C; Ando H; Sugimoto H
通讯作者：
Sugimoto H

リン脂質輸送タンパク質StarD7がミトコンドリアにおいて果たす役割

磷脂转运蛋白 StarD7 在线粒体中的作用

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
堀端康博;杉本博之
通讯作者：
杉本博之

Transcription of cytochrome P450 46A1 in NIH3T3 cells is negatively regulated by FBS

NIH3T3 细胞中细胞色素 P450 46A1 的转录受到 FBS 的负调控

DOI：
10.1016/j.bbalip.2022.159136
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Shinohara Y; Ando H; Maekawa M; Arai M; Horibata Y; Satou M; Jojima T; Usui I; Aso Y; Sugimoto H.
通讯作者：
Sugimoto H.

L-type amino acid transporter 1, LAT1, in growth hormone-producing pituitary tumor cells

产生生长激素的垂体肿瘤细胞中的 L 型氨基酸转运蛋白 1 (LAT1)

DOI：
10.1016/j.mce.2020.110868
发表时间：
2020-06-21
期刊：
Molecular and Cellular Endocrinology
影响因子：
4.1
作者：
M. Satou;Jason Wang;Tae Nakano;Mariko Teramachi;Tokiko Suzuki;Keitaro Hayashi;S. Lamothe;Yubin Hao;Harley T. Kurata;H. Sugimoto;C. Chik;T. Tateno
通讯作者：
T. Tateno