Functional analysis of striatal astrocytes associated with allodynia in a rat model of Parkinson's disease

帕金森病大鼠模型中纹状体星形胶质细胞与异常性疼痛相关的功能分析

基本信息

批准号：
21K07503
负责人：
石田康
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は，片側パーキンソン病モデルラットに生じるアロディニア（触刺激で誘発される痛み）様症状の発現に線条体のアストロサイト（グリア細胞の一種）が，どのような機序・様式で関与しているのかを，行動観察，光遺伝学（オプトジェネティックス），インビボダイアリシス法（疼痛関連物質の一酸化窒素，グルタミン酸動態の観察手段），免疫組織化学法を用いて解析する行動薬理学的研究である。本研究の成果は，パーキンソン病に伴う疼痛の発現機序の解明，治療法開発の基礎データになると確信する。1)6-hydroxydopamineによる片側パーキンソン病モデルラットの作製:三種混合麻酔薬(塩酸メデトミジン，ミダゾラム，酒石酸ブトルファノール)投与下，脳定位的に6-OHDAを片側の内側前脳束へ微量注入することにより，中脳ドーパミン（DA）神経を化学破壊した6-OHDAラット(片側パーキンソン病モデルラット)を作製した。6-OHDA注入2週間後に，メタンフェタミン誘起回転運動を観察し行動の偏位を定量化し，一定の基準に満たなかった動物は本実験より除外した。2)6-OHDAラットにおいて破壊側優位にアロディニアが生じることを行動実験により確認した。上記研究と関連した実験として，痒みモデルマウスに対するL-DOPAの掻痒抑制作用に関する行動薬理学的な研究を遂行している。現時点では予備的な実験にとどまっているものの，脳内の複数の部位で，L-DOPAによるc-Fos発現の減少傾向がみられた。

本研究旨在探讨纹状体星形胶质细胞（一种胶质细胞）参与单侧帕金森病模型大鼠出现的异常性疼痛（触觉刺激引起的疼痛）症状表达的机制和方式，并通过行为观察进行行为药理学分析。、光遗传学、体内透析（一种观察疼痛相关物质一氧化氮和谷氨酸动态的手段）以及免疫组织化学的研究。我们相信，这项研究的结果将为阐明帕金森病相关疼痛机制和开发治疗方法提供基础数据。 1）使用6-羟基多巴胺创建单侧帕金森病模型：在三重麻醉混合物（盐酸美托咪定，咪达唑仑，酒石酸布托啡诺）的施用下，将6-OHDA立体定向注射到一侧内侧前脑束中我们创建了6个。 -OHDA大鼠（单侧帕金森病模型大鼠），其中中脑多巴胺（DA）神经元被化学破坏。注射 6-OHDA 两周后，观察甲基苯丙胺诱导的旋转运动，并对行为偏差进行量化，不符合某些标准的动物被排除在实验之外。 2）我们通过行为实验证实，6-OHDA大鼠的异常性疼痛主要发生在受损侧。作为与上述研究相关的实验，我们正在进行L-DOPA对瘙痒模型小鼠的止痒作用的行为药理学研究。尽管目前这仍是初步实验，但在大脑内的多个区域观察到左旋多巴导致 c-Fos 表达减少的趋势。