腸管粘液由来の糖利用競争力を介したクレブシエラ菌の腸内定着に及ぼす影響の解明

通过竞争性利用肠道粘液中的糖分，阐明克雷伯氏菌对肠道定植的影响

基本信息

批准号：
21K09861
负责人：
深町はるか
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

今年度は、昨年度確立したSPFおよび無菌マウスのクレブシエラ腸管定着マウスモデルを用いて、糖の取込み機構の１つであるマンノースホスホトランスフェラーゼシステム(PTS)の腸管への定着に及ぼす影響を解明することとした。初めに昨年に引き続き、マンノースPTSが腸管定着における競争上の優位性となるか、SPFクレブシエラ腸管定着マウスおよびクレブシエラgnotobioteマウスを用いてcompetitive assay(競合的コロニー形成法)で検討した。クレブシエラ菌野生株(WT)とマンノースPTS欠損株(KO)を等量混和し、マウスに感染後、1,3,7,14,21日後の糞便を回収し、マンノース分解能を指標とした寒天平板でWT,KOの菌数を求め、Competitive index(CI)=ratio out (KO/WT)/ratio in (KO/WT) CI<1:WT優位 CI>1:KO優位　で判定した。クレブシエラgnotobioteマウスでは、感染14,21日後はCI=0.52(p=0.0005),0.19(p=0.00018)となった。SPFクレブシエラ腸管定着マウスでは、感染3,7,14,21日後でCI=0.47(p=0.002), 0.29(p=0.0007), 0.18(p=0.0003), 0.15(p=0.0004)となり、SPF,gnotobiote共にWTが優位となり、マンノースPTSが腸管への定着に関与することが示された。続いて、腸管の免疫応答を解析するために、SPFクレブシエラ腸管定着マウスの腸管上皮間リンパ球および粘膜固有層リンパ球を採取し、CD3抗体、CD4抗体、CD45抗体、IFN-gamma抗体、IL17A/F抗体で染色し、FACS解析でTh1, Th17応答を解析を行っている。

今年，我们决定使用去年建立的SPF和无菌小鼠的克雷伯氏菌肠道定植的小鼠模型，以阐明甘露糖磷酸转移酶系统（PTS）的影响，这是糖uptake的机理之一，一种对肠道结肠化的机制之一。首先，在去年之后，我们研究了使用SPF Klebsiella肠道定植和使用竞争性定殖化的甘露糖PTS在肠道定植方面的竞争优势。将相等量的克雷伯氏菌野生应变（WT）和甘露糖PTS缺陷株（KO）混合在一起，感染后，感染后1、3、7、14和21天收集了粪便，并确定了细菌WT和KO的数量，并确定了使用MANNOSE分辨率在琼脂板上确定了iNgeex and Index and a Index and ko ko in Index and Bacteria和Bacteria，并确定了Bacteria和BACTERIAN和BACTERIA，并确定BACTERIAN和BACTERIA中的数量和数量，该数量是数量和数量。（ci）=比率out（ko/wt）/比率（ko/wt）ci <1：wt优势ci> 1：ko优势。在克雷伯菌gnotobiote小鼠中，CI = 0.52（p = 0.0005），0.19（p = 0.00018）为14且感染后21天。 In SPF Klebsiella intestinal colonization mice, CI=0.47 (p=0.002), 0.29 (p=0.0007), 0.18 (p=0.0003), and 0.15 (p=0.0004) was at 3, 7, 14, and 21 days after infection, indicating that WT was dominated by both SPF and gnotobiote, indicating that mannose PTS was involved in colonization to the肠道。接下来，为了分析肠道的免疫反应，上皮间淋巴细胞和lamina propria粘膜淋巴细胞从Spf klebsiella肠肠结合小鼠中收集，用CD3，CD4，CD4，CD45，IFN-GAMMA和IL17A/F抗体分析染色，并分析了CD3，CD4，CD4，CD4，CD4，CD45。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

口腔粘膜好中球の分化誘導における常在細菌叢の役割

常驻菌群在诱导口腔粘膜中性粒细胞分化中的作用

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
永尾潤一;岸川咲吏;豊永憲司;根来（安松）香奈江;田﨑園子;田中芳彦;森美菜，林真奈美，中村夏野，逸見百江，黒澤実愛，深町はるか，森崎弘史，桑田啓貴
通讯作者：
森美菜，林真奈美，中村夏野，逸見百江，黒澤実愛，深町はるか，森崎弘史，桑田啓貴

ヒト口腔細菌叢移植マウスの急性肺障害誘導による誤嚥性肺炎マウスモデルの作製

人口腔菌群移植诱导小鼠急性肺损伤建立吸入性肺炎小鼠模型

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
岸川咲吏;永尾潤一;豊永憲司;根来（安松）香奈江;田中芳彦;小田島健二　野上晋之介　梶田倫功　山内健介　熊本裕行　髙橋哲;林真奈美，森美菜，逸見百江，黒澤実愛，深町はるか，森崎弘史，桑田啓貴
通讯作者：
林真奈美，森美菜，逸見百江，黒澤実愛，深町はるか，森崎弘史，桑田啓貴

HOMA(ヒト口腔細菌定着)マウスモデルを用いた口腔常在菌による肺炎増悪誘導の解析

使用 HOMA（人类口腔细菌定植）小鼠模型分析口腔常驻细菌诱导肺炎恶化的情况