CRF受容体1および2遺伝子改変マウスによるCRFニューロン回路の同定と機能解析

使用 CRF 受体 1 和 2 基因修饰小鼠对 CRF 神经元回路进行识别和功能分析

基本信息

批准号：
21K08563
负责人：
井樋慶一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku Fukushi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は最近，CRF受容体1 （CRFR1）遺伝子，または，CRF受容体2（CRFR2）遺伝子にCreリコンビナーゼをノックインしたマウス（CRFR1-CreおよびCRFR2-Cre）を作製した．これらのドライバーマウスとGFPレポーターマウスを交配して作製したCRFR1発現ニューロン選択的GFP発現マウス，および，CRFR2発現ニューロン選択的GFP発現マウスを用いて，マウス脳内におけるCRFR1およびCRFR2発現ニューロンの分布を検討した．この実験は前年度に既に行ったものであるが，一部実験結果に不確かな部分があったので再実験を行なった．CRFR1およびCRFR2発現ニューロンの脳内分布はこれまでにin situ hybridization法を用いて検討された結果にほぼ一致した．次に，CRFR1発現ニューロンおよびCRFR2発現ニューロンの投射先を明らかにするために，Cre依存的GFP発現ウイルスベクターを局所注入し，これらのニューロンを順行性に追跡した．まず初めに視床下部室傍核（PVH）に存在するCRFニューロンの部位にウイルスベクターを注入したところ，これらのニューロンは，孤束核，青斑核，視床室傍核，外側視床下部など広範な脳内に投射することが明らかにされた．孤束核にはCRFR2発現ニューロンが認められたので，現在これらのニューロンの投射神経路を追跡中である．

我们最近创建了将CRE重组酶撞入CRF受体1（CRFR1）基因或CRF受体2（CRFR2）基因的小鼠（CRFR1-CRE和CRFR2-CRE）。我们使用表达CRFR1的神经元选择性表达GFP和表达CRFR2的神经元在小鼠脑中表达CRFR1神经元的分布，这些神经元是通过用GFP报告的小鼠跨这些驱动小鼠而产生的，并表达CRFR2的神经元。该实验已经在上一年进行，但是实验结果中存在一些不确定性，因此我们进行了重新检查。 CRFR1和表达CRFR2神经元的大脑分布几乎与迄今使用原位杂交所检查的结果不一致。接下来，为了阐明表达CRFR1的神经元和表达CRFR2神经元的位置，局部注射了依赖CRE的表达GFP的病毒载体，并且这些神经元被前进跟踪。首先，当病毒载体被注入下丘脑旁脑室核（PVH）中存在的CRF神经元部位时，发现这些神经元会突显成各种脑部，包括孤立核，包括坐基因核，基因座，侧脊髓核，脊髓脊髓核和后期下丘脑。由于在孤立核中观察到表达CRFR2的神经元，因此目前正在跟踪这些神经元的投影途径。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Cre-dependent ACR2-expressing reporter mouse strain for efficient long-lasting inhibition of neuronal activity.

DOI：
10.1038/s41598-023-30907-2
发表时间：
2023-03-09
期刊：
SCIENTIFIC REPORTS
影响因子：
4.6
作者：
Mukai, Yasutaka;Li, Yan;Nakamura, Akiyo;Fukatsu, Noriaki;Iijima, Daisuke;Abe, Manabu;Sakimura, Kenji;Itoi, Keiichi;Yamanaka, Akihiro
通讯作者：
Yamanaka, Akihiro