Analyses of the mechanism of the nuclear shaping and its medical application

核塑形机理分析及其医学应用

基本信息

批准号：
21K06174
负责人：
谷時雄
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、放線菌培養上清から分離した核の分葉化を誘導する化合物2057を用いて、細胞分化や癌化の過程における核の形を変化させるしくみの解明、即ち、核の形が変わることで遺伝子発現や、核内クロマチン環境が受ける変化とその生物学的意義について解明することを目的としている。現在までに、分化に伴い核が分葉化する好中球細胞や、発症と共に核が分葉化する成人Ｔ細胞白血病(ATL)について、化合物2057処理によるHeLa細胞核の分葉化モデルとして提唱したPYTD 核分葉化modelで、好中球やATLにおける核の分葉化も説明できることを明らかにした。また、RNA結合タンパク質YB-1が核分葉化のキー因子であることを解明した。令和4年度では、核分葉化初期において遺伝子発現が大きく変動することがRNA-Seq解析で示された7種類のRNAについて解析を進めた。これらのRNAは全て機能未知の長鎖非翻訳性RNAであった。しかも、それらのうちRP11-6F2.5 および RP11-7F17.7 ncRNAは、好中球とATLの核分葉化初期に共に発現が大きく上昇することが示された。さらに、免疫共沈実験で、核分葉化に関わるリン酸化YB-1/γ-tubulin複合体に、RP11-6F2.5 ncRNAが含まれていることが示された。これらの結果は、RP11-6F2.5 ncRNAが核分葉化に密接に関与している可能性を示唆している。今後、siRNAを用いたノックダウンや過剰発現実験などを行い、RP11-6F2.5 ncRNAの核分葉化における機能を解明する予定である。また、分葉核を元の球状の正常核様形態に戻す化合物YG217及びYG258処理細胞についてRNA-Seq大規模発現解析を行い、YG217とYG258が異なる作用機作で核形態を元の形状に戻している可能性を明らかにした。

这项研究旨在阐明使用2057化合物在细胞分化和癌性过程中改变核形状的机制，该化合物2057诱导了从放线症菌群培养的上网中分离出的细胞核的小叶，即阐明在核儿童环境及其生物学意义上发生的变化时，其生物学意义发生了变化。迄今为止，我们已经透露，在中性粒细胞中，核被分为分化和成年T细胞白血病（ATL）的小叶，其中核被核分为带有发育的小叶，PYTD核肺泡模型被认为是通过对COLLIOND 2057的核心核的处理，可以用作Hela细胞核的模型，并可以解释cody and cuntul and cuntion nitul nitul nitul fo n cot n naturopl for for n n natruction。此外，揭示了RNA结合蛋白YB-1是核叶的关键因素。在2022年，我们分析了七种类型的RNA，通过RNA-seq分析显示，在核叶的早期阶段，基因表达显着波动。所有这些RNA都是具有未知功能的长链，未翻译的RNA。此外，结果表明，在中性粒细胞和ATL的核叶的早期，RP11-6F2.5和RP11-7F17.7 NCRNA的表达都显着增加。此外，共免疫沉淀实验表明，参与成核的磷酸化YB-1/γ-微管蛋白复合物包含RP11-6F2.5 NCRNA。这些结果表明RP11-6F2.5 NCRNA可能与核叶密切相关。将来，我们计划使用siRNA进行敲低和过表达实验，以阐明RP11-6F2.5 ncRNA在核叶中的功能。我们还对用YG217和YG258处理的细胞进行了大规模的RNA-SEQ表达分析，这些细胞将小核恢复到其原始球形正常核形态的原始核形态，从而揭示了YG217和YG258通过不同动作机制将其原始形状恢复到其原始形状的可能性。