牛奶中多类型β-内酰胺酶通用免疫学构效关系及分析应用研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81001248
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    18.0万
  • 负责人：
    周爽
  • 依托单位：
    国家食品安全风险评估中心
  • 学科分类：
    H3004.食品卫生
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

随着我国乳制品抗生素残留限量的不断降低，β-内酰胺酶常被违法添加以有效水解抗生素，从而导致消费者食用后耐药性增高，抵抗力下降。β-内酰胺酶种类繁多，目前的检测方法或为针对单一种类酶分子的"一对一"检测，或为间接检测抗生素底物或水解产物的定性方法。本课题拟对可直接检测多种β-内酰胺酶的"一对多"定量免疫检测方法进行研究。通过改进抗体制备技术，获得可识别牛奶中多种β-内酰胺酶的广谱特异性抗体；选择适当的分析模式及标记技术，建立免疫检测试剂盒；并研究β-内酰胺酶在添加入牛奶后的活性代谢过程，为监管部门从不同环节监测、控制奶品质量提供重要的技术依据。同时，以此体系为平台进行多目标抗原广谱特异性抗体的制备方法、抗原氨基酸序列相似性与抗体亲和力的半定量关系、以及蛋白质二级或三级结构免疫原性的研究，深入探索免疫学规律，为预测抗体性质，间接制备不稳定或不易获得的蛋白的抗体提供参考依据。

结项摘要

本研究针对我国乳及乳制品中违法添加β-内酰胺酶以水解超标抗生素的现象，开展了相关研究。以免疫分析和生物传感器为手段，通过改进抗体制备技术、优化抗体标记及固定化模式，成功建立了快速、灵敏、低成本、高通量的β-内酰胺酶半定量免疫检测试剂盒，以及国际先进的酶热生物传感器定量检测技术（定量限达4 U/mL）。获得了能够识别多组分β-内酰胺酶的广谱特异性抗体，并初步探索了抗原氨基酸序列相似性与免疫原性之间的关系。在此基础上，利用所建立的分析技术研究了β-内酰胺酶在乳品加工及存放过程中的变化轨迹，低温长时间和高温短时间巴氏杀菌过程均不会对牛奶中β-内酰胺酶活性产生显著影响，而经过超高温灭菌后，β-内酰胺酶活性消失，为监测产品和时机的选择提供了依据。同时，对全国部分地区的乳品进行了β-内酰胺酶本底调查，总检出率仅为3.8%，为内外源性β-内酰胺酶的界定及违法添加的判定提供了依据。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
β-内酰胺酶广谱特异性抗体制备及免疫分析方法建立
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    卫生研究
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周爽;袁瑶;郭振泉;赵云峰
  • 通讯作者：
    赵云峰
Enhancing the selectivity of enzyme detection by using tailor-made nanoparticles.
通过使用定制的纳米颗粒增强酶检测的选择性。
  • DOI：
    10.1021/ac4007914
  • 发表时间：
    2013-05
  • 期刊：
    Analytical Chemistry
  • 影响因子：
    7.4
  • 作者：
    Liu, Yibin;Wang, Shanshan;Zhang, Chen;Su, Xin;Huang, Shan;Zhao, Meiping
  • 通讯作者：
    Zhao, Meiping
酸奶中β-内酰胺酶的快速检测方法
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国卫生工程学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周爽;马兰;赵馨;杨大进
  • 通讯作者：
    杨大进

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  • 通讯作者：
    周爽

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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