FSH抑制猪颗粒细胞中促凋亡蛋白Bim表达的分子机制

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31072031
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    33.0万
  • 负责人：
    曾申明
  • 依托单位：
    中国农业大学
  • 学科分类：
    C1704.畜禽繁殖学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31
  • 项目参与者：
    韩国才； 唐大伟； 鲍忠剑； 王宪龙； 仵毅； 武玥； 刘振兴； 李迎；
  • 关键词：
    FSHBim颗粒细胞猪凋亡

项目摘要

为探讨促凋亡蛋白Bim在卵泡闭锁中的作用，以及FSH调控猪颗粒细胞中Bim表达的分子机制，课题组将在前期工作的基础上，首先，采用TUNEL和免疫组化等技术确认Bim蛋白的表达水平与卵泡发育状况的相关性；然后，用已建立的猪颗粒细胞体外培养模型，探讨FSH浓度与颗粒细胞凋亡、Bim基因表达水平的关系；接着，分别用添加PI3K、MAPK和ERK激酶通路抑制剂的培养液，通过凋亡检测筛选FSH对Bim调控的主要路径；再结合基因超表达、RNA干涉以及Western Blot等技术，探索FSH对Bim调控的关键因子；最后，采用免疫组化技术观察关键调控因子表达水平与猪卵泡闭锁状态的关系，验证此通路在活体中是否存在。研究结果将从细胞凋亡角度揭示FSH与卵泡发育或闭锁的分子联系，丰富哺乳动物的卵泡闭锁理论。同时，通路中发现的关键因子可能为控制哺乳动物卵泡发育药物的研发提供新的靶点。

结项摘要

本课题首先分析了bim基因在猪颗粒细胞中的表达水平与卵泡闭锁的关系。然后，依据颗粒细胞和卵丘细胞对不同激素或因子敏感性差异，采用原代颗粒细胞血清饥饿培养和去除卵母细胞的卵丘细胞复合体培养为模型，分别研究了FSH和生长分化因子9(GDF9)对颗粒细胞和卵丘细胞中bim基因表达及凋亡的影响。最后，深入研究了FSH和GDF9调控bim基因表达的分子通路。研究结果表明，卵泡体细胞中bim基因的表达水平与猪卵泡闭锁状态密切相关，bim表达水平升高，卵泡闭锁，反之，卵泡发育正常；超表达BimEL蛋白能导致体外培养的猪颗粒细胞凋亡。FSH和GDF9分别通过抑制颗粒细胞和卵丘细胞中BimEL蛋白表达来阻止细胞凋亡，并且这种抑制作用是通过PI3K/Akt/FOXO3a信号通路来实现的。本项目发现了FSH和GDF9新的生物学功能和其分子机制，并提出bim基因在猪卵泡闭锁过程中发挥关键作用。在项目完成期间，已发表SCI研究论文5篇，获得国家发明专利1项，培养10名研究生，受邀国际学术会议学术报告1次。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（1）
The disturbances of endoplasmic reticulum calcium homeostasis caused by increased intracellular reactive oxygen species contributes to fragmentation in aged porcine oocytes.
细胞内活性氧增加引起的内质网钙稳态紊乱导致衰老猪卵母细胞破碎。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Biology of Reproduction
  • 影响因子：
    3.6
  • 作者：
    Tang, Da-Wei;Fang, Yuan;Liu, Zhen-Xing;Wu, Yi;Wang, Xian-Long;Zhao, Shuan;Han, Guo-Cai;Zeng, Shen-Ming
  • 通讯作者：
    Zeng, Shen-Ming
Relationship Between Differential Expression of Bax and Bcl-2 Genes and Developmental Differences of Porcine Parthenotes Cultured in PZM-3 and NCSU-23
Bax和Bcl-2基因差异表达与PZM-3和NCSU-23培养猪单性生殖发育差异的关系
  • DOI：
    10.1016/s1671-2927(11)60177-6
  • 发表时间：
    2011-11
  • 期刊：
    Agricultural Sciences in China
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Cui Mao-sheng;Liu Zhen-xing;Wang Xian-long;Zhang Jing;Wu Yi;Han Guo-cai;Zeng Shen-ming
  • 通讯作者：
    Zeng Shen-ming

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其他文献

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猪卵泡在闭锁过程中颗粒细胞内BimEL磷酸化修饰位点的变化规律及主要调控路径
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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