利用同卵双生子模型研究婴幼儿血管瘤的发病机制

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81171827
项目类别：
面上项目
资助金额：
60.0万
负责人：
林晓曦
依托单位：
上海交通大学
学科分类：
H1704.体表组织器官畸形、损伤与修复、再生
结题年份：
2015
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
陈晓东；马刚；叶肖肖；胡晓洁；金云波；陈辉；吴娟娟；
关键词：
发病机制婴幼儿血管瘤同卵双生血清miRNA

项目摘要

婴幼儿血管瘤在新生儿中发病率高达1%，给无数患者与家庭带来不幸与痛苦。此外，虽然至今发病机制不明，但其快速增生与自然消退的特性，使之成为观察人类血管生成规律的特殊窗口。血清是我们研究婴幼儿血管瘤发生发展机制的新切入点。miRNA是目前最重要的一类基因表达调控因子。通过miRNA芯片技术配对检测每对单个患血管瘤的同卵双生子增生期的血清中miRNA表达谱，可获得差异性显著的miRNA；并在大样本量的普通患儿血清中对这些筛选出的miRNA进行验证。然后利用细胞转染技术对差异性miRNA进行细胞学功能研究，获得有继续研究价值的关键性miRNA。最终从血清学角度接近并了解婴幼儿血管瘤的发生发展和消退的特殊机制。

结项摘要

背景及目的：婴幼儿血管瘤在新生儿中发病率高达1%。因具有独特的增生消退的临床特征，血管瘤的发病机制广受关注却仍未阐明。目前已经公认的血管瘤标志物GLUT-1，需依赖组织学检查，且无法区分增生消退的病程变化，对于血管瘤发生机制的提示意义有限。因此，急需寻找新的血管瘤特异性标记。microRNA（miRNA）作为新的肿瘤标志物被广为关注，血清microRNA具有较好的稳定性业已被用于肿瘤无创性标志物的研究。本研究首先以同卵双生子为研究模型，获得有继续研究价值的miRNA。最终从血清学角度接近并了解婴幼儿血管瘤的发生的特殊机制。.方法：利用TaqMan低密度芯片检测单个患病的血管瘤同卵双生子血清差异miRNA的表达谱，筛选差异显著的miRNA,TaqMan探针qRT-PCR进行验证，并构建差异miRNA的功能调控网络，并在普通婴幼儿血管瘤增生期患儿血清中，检测差异性miRNA的变化，以正常黑色素痣患儿血清为对照，以qRT-PCR技术定量检测差异性miRNA，以细胞转染技术对差异性miRNA进行细胞学功能验证。.结果：同卵双生子血清miRNA芯片检测筛选8个差异miRNA,其中hsa-miR-518a-3p、hsa-miR-518e、hsa-miR-519a、hsa-miR-512-3p在血管瘤组中属上调基因，hsa-miR-216b、hsa-miR-409-5p、hsa-miR-544、hsa-miR-606在血管瘤组均属下调基因。qRT-PCR验证miR-409-5p和miR-606在疾病和正常对照组血清不表达，miR-544验证结果表达趋势与芯片相反，miR-518a-3p在40例血管瘤血清中均检出，在13例对照血清中有12例（92.3%）为Undetermined。miR-518e在40例血管瘤血清中有3例（7.5%）为Undetermined，在13例对照血清中有12例（92.3%）为Undetermined。转染miR-518a-3p入血管瘤干细胞后，其增殖能力增强，凋亡减少。.结论及意义：以单个患血管瘤的同卵双生子为模型，利用TaqMan低密度芯片筛选和qRT-PCR验证，血清miR-518a-3p和miR-518e具有用于血管瘤的早期鉴别诊断的潜能。miR-518a-3p对可提高血管瘤干细胞增殖活性并下调凋亡水平，对婴幼儿血管瘤的发生机制具有重要提示意义。