Core B - Advance Imaging Core

核心 B - 高级成像核心

基本信息

项目摘要

Summary The Proteostasis Advanced Imaging Core (Core B) referred in the Program Project (PP) text as “Image Core” will serve the four projects and the Innovation component of Core D of this PP. The long-term goal is to provide support on image-based studies to understand the cellular and subcellular changes in autophagy dynamics during aging and in the context of Alzheimer disease (AD)-related proteotoxicity. The specific aims of the core are: 1) to provide an imaging resource customized for the study of proteostasis in aging that will assist the PP investigators in the experimental preparation related to: basic microscopy techniques (wide-field microscopy, confocal microscopy, live cell imaging - at Mount Sinai/Einstein) and electron microscopy (at Einstein); 2) to provide a state-of-the art in vivo imaging platform based on two-photon microscopy (Innovation Unit - Mount Sinai) for dynamic analysis of changes in autophagy in brain and peripheral tissues in physiological aging and in disease; 3) to implement clearing imaging techniques and light-sheet microscopy for volume imaging to study autophagy in whole organs (Innovation Unit); 4) to develop STED superresolution imaging methods to study the dynamics of autophagy at the organelle level by nanoscale imaging (Innovation Unit). Components: 1) The Imaging unit provides advice on sample preparation/processing, techniques and procedures for imaging in vivo and fixed samples. Performs electron microscopy (at Einstein) and specialized imaging procedures (at Mount Sinai) such as intravital microscopy, light-sheet imaging, STED superresolution and assists with imaging data interpretation; 2) The innovation unit (at Mount Sinai) will develop and implement procedures specific for analysis of autophagy at the tissue level (light-sheet imaging, intravital microscopy) and at the single molecule level (superresolution imaging) in aging and AD. Services: The core will continue offering i) assistance with regular wide-field microscopy, real-time live cell imaging, confocal and electron microscopy, ii) distributing common reagents (antibodies, probes and fluorescence dyes), iii) sharing detailed protocols for image-based procedures and iv) compiling the image- based information for the PP data base. In addition, during this period the core has now incorporated: i) high- resolution imaging procedures such as intravital two-photon microscopy, superresolution STED imaging and light-sheet microscopy for volume imaging, ii) assistance with sample preparation for these procedures (in vivo mouse preparation, clearing methods) and iii) access to new image analysis software (IMARIS, ARIVIS, Huygens) available at the Microscopy CoRE at Mount Sinai. Relevance: The new technology incorporated in the core now allows dynamic and molecular resolution imaging to study aging and AD-related changes in autophagy at the subcellular level. This information is essential for future implementation of therapeutic approaches aiming at reverting these changes. The centralization of these new procedures optimizes cost efficiency and guarantees standardization and integration of the different groups.
概括 蛋白质稳态高级成像核心(核心 B)在计划项目 (PP) 文本中称为“图像 Core”将服务于该PP的四个项目和Core D的创新部分。 长期目标是为基于图像的研究提供支持,以了解细胞和亚细胞 衰老过程中以及阿尔茨海默病(AD)相关蛋白毒性背景下自噬动力学的变化。 核心的具体目标是:1)提供为蛋白质稳态研究定制的成像资源 在老化方面,将协助 PP 研究人员进行与以下相关的实验准备:基本显微镜检查 技术(宽视野显微镜、共焦显微镜、活细胞成像 - 在西奈山/爱因斯坦)和电子 显微镜(爱因斯坦);2)提供基于双光子显微镜的最先进的体内成像平台 (创新单位 - 西奈山)用于动态分析大脑和周围组织自噬的变化 生理衰老和疾病;3)实施透明成像技术和光片显微镜 体积成像研究整个器官的自噬(创新单元 4)以开发 STED 超分辨率; 通过纳米级成像研究细胞器水平自噬动态的成像方法(创新 单元)。 组成部分:1) 成像装置提供有关样品制备/处理、技术和 进行体内和固定样品成像的程序(在爱因斯坦)和专门的。 成像程序(在西奈山),例如活体显微镜、光片成像、STED 超分辨率 并协助成像数据解释;2) 创新部门(位于西奈山)将开发和实施 用于组织水平自噬分析的特定程序(光片成像、活体显微镜)和 在衰老和 AD 中的单分子水平(超分辨率成像)。 服务:核心将继续提供 i) 定期广域显微镜、实时活细胞方面的帮助 成像、共聚焦和电子显微镜,ii) 分发常用试剂(抗体、探针和 荧光染料),iii)共享基于图像的程序的详细协议和 iv)编译图像- 此外,在此期间,核心已纳入: i) 高- 分辨率成像程序,例如活体双光子显微镜、超分辨率 STED 成像和 用于体积成像的光片显微镜,ii) 协助这些程序的样品制备(体内 小鼠准备、清除方法)和 iii)使用新的图像分析软件(IMARIS、ARIVIS、 惠更斯)可在西奈山显微镜中心获得。 相关性:核心中采用的新技术现在可以实现动态和分子分辨率成像 在亚细胞水平上研究衰老和 AD 相关的自噬变化,这一信息至关重要。 未来实施旨在恢复这些变化的治疗方法。 新程序优化了成本效率并保证了不同组的标准化和集成。

项目成果

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