視床下部、下垂体ホルモン遺伝子転写関連因子の単離とその機能解析

下丘脑和垂体激素基因转录相关因子的分离及其功能分析

基本信息

  • 批准号:
    08877162
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.09万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は内分泌組織における、ホルモン遺伝子の発現調節機構を検討するために、その遺伝子発現、およびその転写調節にかかわる因子群の単離を目指してきた。近年の研究で転写に関わる因子の多数ありその全容は以前考えられていたものよりはるかに複雑であることが明らかになってきた。本研究では、下垂体の発生、分化にとって重要な因子でありまた同時に成熟下垂体において成長ホルモン、プロラクチン、TSH遺伝子の転写調節因子であるPit-1の転写調節に関与する因子の単離を試みた。方法は酵母two-hybridシステムを用いてヒトPit-1をbaitとしてヒト胎児脳のライブラリーをスクリーニングした。その結果得られた陽性クローンのうち一つはin vivo,in vitroのいずれにおいても、Pit-1との特異的な相互作用を有していた。またその組織分布をNorthern blotにて検討するとこの遺伝子は下垂体を含めた広い組織においてその発現を認めた。またRT-PCR法においては、下垂体腫瘍においてもその発現を認めたが腫瘍の内分泌的な性格との相関は明らかでなかった。またこの因子のPit-1転写活性化能に与える影響を検討したところ、この因子そのものは転写活性化能を有しないがPit-1の転写活性化能を更に増強させることが明らかになった。以上のことよりこの因子が下垂体においてPit-1による転写調節に対してcoactivaterとして機能していることが考えられる。
为了研究内分泌组织中激素基因表达的调控机制,我们旨在分离一组参与基因表达和转录调控的因子。最近的研究表明,转录涉及很多因素,整体情况比之前想象的要复杂得多。在本研究中,我们试图分离参与Pit-1转录调控的因子,Pit-1是垂体发育和分化的重要因子,也是生长激素、催乳素和TSH基因的转录调控因子。成熟的垂体。该方法是以人Pit-1为诱饵,利用酵母双杂交系统筛选人胎脑文库。获得的阳性克隆之一在体内和体外均与Pit-1有特异性相互作用。此外,当使用Northern印迹检查其组织分布时,发现该基因在包括垂体在内的多种组织中表达。此外,在RT-PCR中,在垂体肿瘤中也观察到其表达,但与肿瘤的内分泌性质没有明确的相关性。此外,当我们考察该因子对Pit-1转录激活能力的影响时,我们发现虽然该因子本身不具有转录激活能力,但它进一步增强了Pit-1的转录激活能力。上述结果表明该因子作为垂体中Pit-1转录调节的共激活因子发挥作用。

项目成果

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