Search for inflammation control using green tea-derived ingredients and caries progression control by inhibition of dental biofilm adhesion

寻找使用绿茶衍生成分控制炎症和通过抑制牙齿生物膜粘附来控制龋齿进展

• 批准号: 22K09997
• 负责人: 井田 貴子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09997/
• 关键词: 歯学; マクロファージ極性制御; デンタルバイオフィルム; カテキン

旧来、う蝕あるいはう蝕継発疾患後に好発する歯の破折が、歯の喪失原因として上位を占めており、う蝕進行阻止および予防は早急に取り組むべき課題である。歯髄炎などのう蝕継発疾患においては、炎症制御が治癒にとって重要となる。炎症制御に関わるマクロファージは炎症性(M1)および抗炎症性(M2)の2つの極性を有し、M1を経てM2に移行すること明らかになりつつある。特にa-dの4つの表現型が同定されているM2については、口腔での機能は不明な点が多い。緑茶由来成分であるEpigallocatechin-3-gallate（EGCG）はM2誘導作用能が知られており、病原化するバイオフィルムが常在する口腔においては、過剰な組織損傷を制御し、組織修復を促進する作用が期待できる。本年度は、in vitroモデルを用いてEGCGがM1およびM2マクロファージの極性変化に及ぼす影響を解析した。まずEGCGの濃度検討を行い、RAW264.7細胞の細胞増殖能に影響を及ぼさない100μMで添加することとした。次に、炎症惹起に用いるLipopolysaccharide(LPS)についても濃度検討を行い、1000ng/mlで添加することとした。RAW264.7細胞を播種して12時間後、LPSおよびEGCGを添加して12時間培養し、マクロファージ極性制御に関連する遺伝子の発現をqPCRにて解析した。M1マーカーであるArg2、Nos2、Il6の発現低下を認めたことから、M1への分極抑制は持続している可能性が示された。また、M2aマーカーであるMrc1の発現はEGCG添加群で上昇しており、M2への誘導が促進されている可能性が示された。

传统上，龋齿或龋齿相关疾病后经常发生的牙齿折断一直是牙齿脱落的主要原因，预防和抑制龋齿的发展是一个应立即解决的问题。在牙髓炎等与龋齿相关的疾病中，控制炎症对于愈合很重要。越来越清楚的是，参与炎症控制的巨噬细胞具有两种极性：炎症（M1）和抗炎（M2），并且它们从M1转变为M2。特别是对于已鉴定出a-d四种表型的M2，其在口腔中的功能还有许多未知之处。表没食子儿茶素-3-没食子酸酯 (EGCG) 是一种源自绿茶的成分，已知能够诱导 M2，控制过度的组织损伤并促进致病性生物膜驻留的口腔中的组织修复。一个效果。今年，我们使用体外模型来分析 EGCG 对 M1 和 M2 巨噬细胞极化变化的影响。首先，我们考察了EGCG的浓度，决定添加100μM，不会影响RAW264.7细胞的细胞增殖能力。接下来，我们还研究了用于诱导炎症的脂多糖（LPS）的浓度，并决定添加1000 ng/ml。接种RAW264.7细胞12小时后，加入LPS和EGCG，培养12小时，通过qPCR分析巨噬细胞极性控制相关基因的表达。 M1 标记 Arg2、Nos2 和 Il6 的表达下降，表明对 M1 极化的抑制可能持续存在。此外，M2a标记物Mrc1的表达在添加EGCG的组中增加，表明可能促进了M2的诱导。