進行・再発食道がんに対する革新的個別化樹状細胞ワクチン療法の開発

开发针对晚期/复发性食管癌的创新个性化树突状细胞疫苗疗法

基本信息

批准号：
22K08785
负责人：
高橋慶太
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究の目的は、食道癌患者におけるネオ抗原ペプチドパルス樹状細胞ワクチンのin vitro 有効性試験を行い、臨床有用性を考察することである。まず、食道癌患者の末梢血及び外科切除検体を用いてネオ抗原解析を行い、5種類のネオ抗原ペプチドを選定しペプチド合成を行った。続いて、同一患者の末梢血から単球を分離し、GM-CSF／IFN-α2b存在下で樹状細胞へと分化誘導後、合成したネオ抗原ペプチド5種類を負荷し、ネオ抗原ペプチドパルス樹状細胞ワクチンを得た。その後、得られた当該ワクチンのin vitro有効性試験を行うために、同ワクチンとCD8陽性T細胞を含む非単球細胞を数日間共培養し、ネオ抗原ペプチド特異的CD8陽性T細胞の誘導を行った後、同一ペプチドで再刺激し産生されるIL-2／IFN-γをELISpotアッセイによって測定した。なお、対照群として共培養していない非単球細胞を用いた。当該年度は、計7例の患者登録を行った。そのうち2例は除外基準に抵触したため除外し、残り5例のうち1例は現在ネオ抗原解析中である。解析が終了した4例中２例において、対照群と比べて共培養群でIFN-γ／IL-2産生量は増加しており、有効性を確認することができた。しかし、残り2例のうち1例については、共培養群でのIL-2産生量の増加を認めたが、IFN-γ産生量は低下していたため、再度確認のため同一患者からネオ抗原ペプチドパルス樹状細胞を作製し再試験を行ったところ、再現性が確認でき前述の2例とは異なるデータが得られた。残りの1例は、共培養時の細胞増殖が不良でELISpotアッセイに必要な細胞数を確保することができなかったため、再試験を予定している。これらの結果からネオ抗原ペプチドパルス樹状細胞ワクチンが食道癌患者におけるネオ抗原ペプチド特異的CD8陽性T細胞を誘導し、抗腫瘍効果に寄与する可能性が示唆された。

本研究的目的是对食管癌患者进行新抗原肽脉冲树突状细胞疫苗的体外功效测试并讨论其临床应用。首先，利用食管癌患者的外周血和手术切除样本进行新抗原分析，选择5种新抗原肽并进行肽合成。接下来，从同一患者的外周血中分离单核细胞，在GM-CSF/IFN-α2b存在下诱导分化为树突状细胞，然后负载五种合成的新抗原肽并进行新抗原肽脉冲树获得了细胞疫苗。然后，为了对获得的疫苗进行体外功效测试，将疫苗和包括CD8阳性T细胞的非单核细胞共培养数天以诱导新抗原肽特异性CD8阳性T细胞。，用相同的肽重新刺激细胞，并通过 ELISpot 测定法测量产生的 IL-2/IFN-γ。请注意，未共培养的非单核细胞用作对照组。年内，共有7名患者登记。其中两例因符合排除标准而被排除，其余五例中的一例目前正在接受新抗原分析。在完成分析的四分之二的情况下，与对照组相比，共培养组的 IFN-γ/IL-2 产生量有所增加，证实了疗效。然而，在其余两例中的一例中，在共培养组中观察到 IL-2 产量增加，但 IFN-γ 产量减少，因此为了再次确认，在脉冲时从同一患者收集了新抗原肽。制作树突状细胞并重新测试，确认了再现性，并获得了与上述两种情况不同的数据。在其余情况下，由于共培养期间细胞生长不良，无法确保 ELISpot 检测所需的细胞数量，因此我们计划重新测试。这些结果表明，新抗原肽脉冲树突状细胞疫苗可在食道癌患者中诱导新抗原肽特异性CD8阳性T细胞，并可能有助于抗肿瘤作用。