Influence of HTLV-1 for autoantibody production system and Th subset

HTLV-1对自身抗体产生系统和Th亚群的影响

基本信息

批准号：
22K08552
负责人：
中村英樹
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08552/
关键词：
シェーグレン症候群 HTLV-1 B細胞

项目摘要

シェーグレン症候群患者末梢血による免疫グロブリンIgGおよび抗Ro/SS-A抗体産生へのHTLV-1感染の影響を観察するため、フィーダー細胞を用いたin vitro抗体産生系作成を行った。CD40リガンドを発現したフィーダー細胞とIL2、IL-10等のサイトカイン刺激の下、シェーグレン症候群患者末梢血より分離したB細胞を培養した。コントロールとして健常人より同様に末梢血B細胞を分離した。培養day8までのIgG産生を見ると、シェーグレン症候群患者および健常人ともに経時的なIgG産生増加が確認できた。さらに、健常人からの特異的自己抗体産生を見るためにこの系を用いてB細胞からの抗サイトメガロIgG産生を確認した。現在、シェーグレン症候群患者末梢血B細胞からの抗Ro60/SS-A抗体産生を確認中である。一方で、これらのB細胞と共培養するHTLV-1陰性およびHTLV-1陽性T細胞株の調整を行っている。共培養に使用するため、T細胞株に放射線照射を行い増殖を抑制できる最良の放射線照射量を検討中である。現在までシェーグレン症候群患者および健常人由来のB細胞とT細胞株の共培養を進めており、HTLV-1非感染T細胞株JurkatおよびMOLT-4との共培養では、IgG産生は殆ど抑制しない結果が得られている。一方で、HTLV-1陽性細胞株を使用した場合には、IgG産生が抑制される傾向が確認された。これらに並行して、抗HTLV-1抗体陽性および陰性シェーグレン症候群患者唾液腺浸潤各級におけるヘルパーT細胞サブセットの免疫染色解析を進めている。陽性コントロールヒト組織の準備と、染色に使用する一次抗体選定を進めている。

为了观察HTLV-1感染对干燥综合征患者外周血免疫球蛋白IgG和抗Ro/SS-A抗体产生的影响，我们使用饲养细胞创建了体外抗体产生系统。从干燥综合征患者的外周血中分离出的 B 细胞与表达 CD40 配体的饲养细胞一起培养，并用 IL2 和 IL-10 等细胞因子刺激。作为对照，以相同的方式从健康受试者中分离外周血B细胞。观察培养第 8 天之前的 IgG 产量，证实干燥综合征患者和健康受试者的 IgG 产量随着时间的推移而增加。此外，我们使用该系统确认 B 细胞产生抗巨细胞 IgG，以观察健康个体特定自身抗体的产生。我们目前正在确认干燥综合征患者的外周血 B 细胞可产生抗 Ro60/SS-A 抗体。同时，我们正在制备 HTLV-1 阴性和 HTLV-1 阳性 T 细胞系，与这些 B 细胞共培养。为了在共培养中使用，我们目前正在研究抑制 T 细胞系增殖的最佳辐射剂量。迄今为止，我们一直在共培养来自干燥综合征患者和健康个体的 B 细胞和 T 细胞系，发现与未感染 HTLV-1 的 T 细胞系 Jurkat 和 MOLT-4 共培养时，IgG 的产生几乎没有受到抑制。得到。另一方面，当使用HTLV-1阳性细胞系时，证实了IgG产生趋于受到抑制。与此同时，我们正在对抗 HTLV-1 抗体阳性和抗 HTLV-1 抗体阳性干燥综合征患者不同级别的唾液腺浸润物中的辅助 T 细胞亚群进行免疫染色分析。我们目前正在准备阳性对照人体组织并选择用于染色的一抗。