PNHクローンのエスケープメカニズムの解明

阐明 PNH 克隆的逃逸机制

• 批准号: 22K08473
• 负责人: 中尾 眞二
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08473/
• 关键词: 発作性夜間ヘモグロビン尿症; HLA-DR15; CD4陽性T細胞; T細胞レセプター; 自己抗原

免疫病態による造血不全において、GPIアンカー膜蛋白欠失（GPI[-])造血幹前駆細胞(PNH型HSPC）がクローン性に増殖するメカニズムを明らかにするため、以下の三つの検討を行った。１．PEで標識した抗CD55抗体と抗CD59抗体と、抗PE抗体でラベルされた磁気ビーズを用いてGPI(-)顆粒球を濃縮することにより検出されるminiscule PNH型顆粒球（miniPNH-G）が、0.003％以上の微少PNH顆粒球が検出されない造血不全例においてどの程度検出されるかを検討した。その結果、miniPNH-Gは微少PNH型血球陰性例の約30％で検出され、全例が免疫抑制療法抵抗性であり、HLAクラスIアレル欠失血球は検出されなかった。現在、体細胞遺伝子変異との関係を検討している。２．HLA-DRB1*15:01陽性再生不良性貧血では、HLA-DR15が提示する自己抗原特異的なCD4陽性細胞がHSPCを傷害し、PNH型HSPCはGPI膜蛋白を欠失させることによってその攻撃を免れていると考えられる。HLA-DRB1*15:01陽性例の中でも、CD4陽性T細胞によるHSPCの攻撃が特に強いと考えられる再生不良性貧血症例の血清中に、HLA-DR15が提示するミスフォールド蛋白に対する自己抗体が存在するか否かを、大阪大学荒瀬尚博士との共同研究により検討した。３．第6染色体短腕の片親性ダイソミーによりHLA-DR15を欠失したiPS細胞および野生型のiPS細胞のそれぞれに由来するHSPCを標的として、自己のHSPCを特異的に傷害するCD4陽性T細胞を同定するため、凍結保存したiPS細胞からのHSPC誘導を行った。

我们进行了以下三项研究，以阐明 GPI 锚定膜蛋白缺陷 (GPI[-]) 造血干祖细胞 (PNH 型 HSPC) 在免疫病理条件引起的造血功能障碍中克隆增殖的机制。 1.使用PE标记的抗CD55和抗CD59抗体以及抗PE抗体标记的磁珠富集GPI(-)粒细胞来检测微小PNH型粒细胞(miniPNH-G) 我们研究了0.003的PNH粒细胞的程度。在无法检测到的造血功能衰竭的情况下检测到 % 或更多。结果，大约 30% 的最小阴性 PNH 血细胞中检测到了 miniPNH-G，所有这些血细胞都对免疫抑制治疗有抵抗力，并且没有检测到 HLA I 类等位基因缺陷的血细胞。我们目前正在研究与体细胞基因突变的关系。 2.在 HLA-DRB1*15:01 阳性再生障碍性贫血中，HLA-DR15 呈递的自身抗原特异性 CD4 阳性细胞会损伤 HSPC，而 PNH 型 HSPC 通过删除 GPI 膜蛋白克服了这种攻击。在 HLA-DRB1*15:01 阳性病例中，再生障碍性贫血病例的血清中存在针对 HLA-DR15 错误折叠蛋白的自身抗体，其中 HSPC 被认为特别容易受到 CD4 阳性 T 细胞的攻击。与大阪大学的Takashi Arase博士进行了联合研究，以检验这是否可能。 3.鉴定通过靶向因 6 号染色体短臂单亲二体性而缺乏 HLA-DR15 的 iPS 细胞和野生型 iPS 细胞衍生的 HSPC，特异性攻击自体 HSPC 的 CD4 阳性 T 细胞。 iPS 细胞。

项目成果

Frequent HLA-DR loss on hematopoietic stem progenitor cells in patients with cyclosporine-dependent aplastic anemia carrying HLA-DR15

携带 HLA-DR15 的环孢素依赖性再生障碍性贫血患者的造血干祖细胞频繁出现 HLA-DR 丢失

• DOI: 10.1038/s41375-022-01549-6
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 11.4
• 作者: Tsuji Noriaki;Hosokawa Kohei;Urushihara Ryota;Tanabe Mikoto;Katagiri Takamasa;Ozawa Tatsuhiko;Takamatsu Hiroyuki;Ishiyama Ken;Yamazaki Hirohito;Kishi Hiroyuki;Ogawa Seishi;Nakao Shinji
• 通讯作者: Nakao Shinji

Diagnosis of immune pathophysiology in patients with bone marrow failure

骨髓衰竭患者的免疫病理生理学诊断

• DOI: 10.1007/s12185-022-03519-1
• 发表时间: 2023
• 影响因子: 2.1
• 作者: Shinji Nakao