アドレノメデュリン－ＲＡＭＰ２システムの病的血管新生における意義の解明

阐明肾上腺髓质素-RAMP2系统在病理性血管生成中的意义

基本信息

批准号：
13J07817
负责人：
田中愛
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年までの検討では、RAMP2遺伝子欠損誘導後に、メラノーマ細胞(B16F10)の皮下移植を行うと、移植した局所での腫瘍の増大が抑制され、更に腫瘍が自壊している様子も観察された。一方、別のメラノーマ細胞(B16BL6)を足底部に移植すると、DI-E-RAMP2-/-では自然肺転移率が上昇するという結果が得られた。詳細な検討を行うと、転移先となる肺では転移が生じる前に、内皮細胞の細胞骨格異常と血管透過性亢進が生じていた。更に、集積した多くの炎症細胞から、S100タンパク質などの腫瘍細胞遊走因子が産生され、がん細胞が生着しやすい環境、「転移前土壌」が形成されていた。平成27年度は、これらの変化が、AM-RAMP2システムを活性化することで抑制され、腫瘍転移を抑制することができるか検討を進めた。RAMP2を過剰発現させた内皮細胞(RAMP2O/E)を樹立し、タイトジャンクションの裏打ちタンパクであるZO-1の免疫染色を行うと、細胞間接着が非常に強固であった。さらにDsRedを導入したB16F10メラノーマ細胞を用いて、内皮細胞との重層培養法にて腫瘍細胞接着の評価を行うと、RAMP2O/Eでは腫瘍細胞の接着が抑制されていた。RAMP2O/Eでは炎症性接着因子であるICAM-1とVCAM-1の発現も抑制されていた。最後に血管内皮細胞特異的にRAMP2を過剰発現させたトランスジェニックマウス(E-RAMP2 Tg)を樹立した。このマウスにB16BL6細胞を移植し、自然肺転移を観察すると、E-RAMP2 Tgでは、野生型マウスと比較して、腫瘍の転移を抑制し、生存率の改善を認めた。以上の結果からAM-RAMP2システムの活性化は、原発巣摘出後の術後アジュバントセラピーの治療標的となる可能性が示された。AM-RAMP2システムの血管恒常性作用に着目することで、抗転移薬への応用が期待される。

直到去年进行的研究表明，在诱导RAMP2基因缺失后将黑色素瘤细胞（B16F10）皮下移植时，移植部位的肿瘤生长受到抑制，并且还观察到肿瘤的自我毁灭。另一方面，当另一种黑色素瘤细胞（B16BL6）被移植到足底区域时，DI-E-RAMP2-/-的自发性肺转移率增加。详细检查发现，在转移目标部位肺发生转移之前，内皮细胞的细胞骨架异常和血管通透性增加。此外，许多积累的炎症细胞产生肿瘤细胞迁移因子，例如S100蛋白，形成“转移前土壤”，这是癌细胞容易扎根的环境。 2015财年，我们研究了是否可以通过激活AM-RAMP2系统来抑制这些变化并抑制肿瘤转移。当我们建立过表达 RAMP2 (RAMP2O/E) 的内皮细胞并对 ZO-1（一种紧密连接的蛋白质）进行免疫染色时，我们发现细胞与细胞的粘附力非常强。此外，当我们使用内皮细胞多层培养方法中使用 DsRed 转染的 B16F10 黑色素瘤细胞评估肿瘤细胞粘附时，我们发现 RAMP2O/E 抑制肿瘤细胞粘附。 RAMP2O/E 中炎症粘附因子 ICAM-1 和 VCAM-1 的表达也受到抑制。最后，我们建立了一种转基因小鼠（E-RAMP2 Tg），其中RAMP2在血管内皮细胞中特异性过度表达。当将 B16BL6 细胞移植到这些小鼠体内并观察到自发性肺转移时，与野生型小鼠相比，E-RAMP2 Tg 抑制了肿瘤转移并提高了生存率。这些结果表明AM-RAMP2系统的激活可能是原发肿瘤切除术后辅助治疗的治疗靶点。通过关注AM-RAMP2系统的血管稳态作用，有望将其应用于抗转移药物中。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

アドレノメデュリン-RAMP2系は、血管恒常性を維持し、「癌転移前土壌」の形成を抑制する

肾上腺髓质素-RAMP2系统维持血管稳态并抑制“癌转移前土壤”的形成

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
田中愛,小山晃英,桜井敬之,神吉昭子,植竹龍一,山内啓弘,五十嵐恭子;鳥山佑一,劉甜,羨鮮,今井章,谷口俊一郎,新藤隆行
通讯作者：
鳥山佑一,劉甜,羨鮮,今井章,谷口俊一郎,新藤隆行

細胞工学

细胞工程

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
井本逸勢;稲澤譲治
通讯作者：
稲澤譲治

信州大学大学院医学系研究科　循環病態学教室ホームページ

信州大学医学研究科循环病理学系主页

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

腫瘍血管新生と転移におけるAM-RAMP2システムの意義

AM-RAMP2系统在肿瘤血管生成和转移中的意义

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
Lei Yang;Takayuki Sakurai;Akiko Kamiyoshi;Yuka Ichikawa-Shindo;Hisaka Kawate;Takahiro Yoshizawa;Tteruhide Kovama. Yasuhiro Iesato;Ryuichi Uetake;Akihiro Yamauchi;Megumu Tanaka;Yuichi Toriyama;Kyoko Igarashi;Takayuki Shindo;Megumu Tanaka;田中　愛;田中愛;田中愛
通讯作者：
田中愛

Pathophysiological roles of adrenomedullin-RAMP2 system in acute and chronic cerebral ischemia