腸管壁在神経細胞の発生過程におけるエンドセリンB受容体の情報伝達系の役割

内皮素B受体信号转导系统在肠壁神经元发育过程中的作用

基本信息

批准号：
08770028
负责人：
桜井武
金额：
$ 0.64万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ジーンターゲッティングにより作製されたエンドセリンB受容体及びエンドセリン3遺伝子欠損マウス、および自然発症の巨大結腸症マウスの解析から腸管壁神経節細胞の発生過程においてエンドセリンB受容体を介するシグナルが必須であることが明かとなっている。またヒトにおいて遺伝性のヒルシュスプルング病患者のエンドセリンB受容体遺伝子座に点突然変異が見出され、またこの変異(W276C)が受容体の機能に障害を与え、病気の原因となっているということが明らかとなった。最近ヒルシュスプルング病患者のエンドセリンB受容体遺伝子座に6種類(G57S,A183G,T244M,R319W,M374I,P383L)の新たな点突然変異が見出された。本研究ではこの点突然変異がヒルシュスプルング病の原因となり得るか否かを明らかにするため、これらの変異受容体のcDNAを各種培養細胞(COS-7,HEK293,Ltk-,CHO-K1)に発現させ、その機能を解析した。その結果これら6種類の変異受容体は野生型と同程度の親和性でリガンドを結合するものの、A183Gにおいては細胞膜上に発現される受容体数の減少、R319W及びM374Iにおいてはその細胞内情報伝達能の障害、P383Lにおいては細胞膜上に発現される受容体数の減少および情報伝達能の障害の両方が認められた。このことより、これら4種類の点突然変異は受容体の機能を障害し、ヒルシュスプルング病の原因になり得ることが示唆された。またG57S及びT244Mの2種類の変異受容体については調べた限り野生型受容体との差異は認められず、多型であると考えられた。

对基因靶向产生的内皮素B受体和内皮素3基因缺陷小鼠的分析，以及自发的巨质小鼠，揭示了通过内皮素B受体介导的信号在肠道壁神经节细胞的发展过程中至关重要。此外，在遗传性Hirschsprung病患者的人类内皮素B受体基因座上发现了一个突变，并且还发现该突变（W276C）会损害受体功能并引起疾病。最近，在Hirschsprung病的患者中，在内皮素B受体基因座发现了六个新点突变（G57，A183G，T244M，R319W，M374i，P383L）。在这项研究中，为了确定该点突变是否可能引起Hirschsprung病，这些突变受体的cDNA在各种培养的细胞（COS-7，HEK293，LTK-，CHO-K1）中表达，并分析了它们的功能。结果，尽管这六个突变受体结合了与野生类型相同亲和力的配体，但两者都减少了A183G细胞膜上表达的受体数量，R319W和M374I中细胞内信号传导能力受损，并且在p383L中受损，在p383L中受损，细胞内信号的信号能力受损。这表明这四种类型的点突变会损害受体功能并引起Hirschsprung氏病。此外，就我们研究而言，两个突变受体G57和T244M之间没有差异。