PDXとドラッグスクリーニングによるARID1A変異婦人科がんの個別化医療開発

利用 PDX 和药物筛选开发针对 ARID1A 突变妇科癌症的个性化医疗

• 批准号: 22K09642
• 负责人: 木瀬 康人
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09642/
• 关键词: 婦人科がん; 卵巣がん; 子宮体がん; ARID1A; ドラッグスクリーニング; 3次元培養; PDX

本研究では、予後不良である抗がん剤抵抗性卵巣癌・子宮体癌に高頻度に認めるARID1A変異に着目し、この遺伝子変異をもつ癌に特徴的な脆弱性を利用した新しい個別化医療の開発を目指している。まず、我々は大阪大学薬学研究科との共同研究にて、FDA承認された薬剤ライブラリーを用いたLarge scale drug screeningを行った。このscreeningでは、ARID1A変異を持つ (ARID1A タンパク低発現) 卵巣明細胞癌細胞株OV207と子宮体癌細胞株HEC1Aと、それぞれの細胞株のDoxycycline誘導性ARID1A強制発現株を用いて、各薬剤を三日間暴露し、WST assayによって比較検討した。1134種の薬剤のうち、OV207とHEC1Aの療法でCell viabilityが50%以下となる化合物63種を同定した。そのうち、再現性を確認し、Doxycycline投与あるいは非投与での差が30%以上となる薬剤を11種検出した。現在これら候補薬剤の抗腫瘍効果、ARID1A発現の有無との関連についてIn vitroで検討を行っている。また今後動物実験モデルでの検討で用いる、婦人科癌患者由来腫瘍 (Patient-derived xenograft; PDX) 同所移植マウスモデルの作成も行っている。現在のところ、卵巣癌PDXを20モデル、子宮体癌PDXモデルを3モデル移植した。PDX腫瘍の回収率は約75%であり、順調にPDXの樹立を行うことが出来ている。今後これらのモデルのARID1A変異の有無の確認、AIRD1Aタンパクの発現を確認する。

在这项研究中，专注于ARID1A突变的新个性化医疗保健在抗癌药物抗药性卵巢癌和子宫体内癌症中经常被识别，这是预后不良的，并且使用了这种遗传突变的特征性脆弱性。首先，我们在大阪大学药学研究生院的一项联合研究中使用了FDA批准的药物图书馆进行了大规模的药物筛查。在此筛查中，使用ARID1A突变（ARID1A蛋白低表达）的三种药物卵巢癌细胞库存OV207和子宫癌细胞HEC1A，而多西环素衍生物ARID1A强制表达了每个细胞，并将其与WST进行了比较。测定。在1134种药物中，OV207和HEC1A治疗中有63种具有细胞活力的化合物为50％或更少。其中，证实了可重现性，并检测到11种具有强力霉素给药或未经服药为30％或以上的药物。目前，体外正在研究这些候选药物的抗肿瘤作用与ARID1A表达的存在或不存在之间的关联。将来，在动物实验模型中使用的妇科癌症患者衍生的肿瘤（患者衍生的异种移植物）也正在创建移植的小鼠模型。目前，已使用三种子宫癌PDX模型移植了20种卵巢癌PDX模型。 PDX肿瘤的回收率约为75％，PDX树也稳定地建立。将来，确认这些模型是否具有ARID1A突变和AIRD1A蛋白的表达。