人工関節周囲感染の制御に向けたマクロファージによる細胞治療の基礎研究

利用巨噬细胞控制假体周围感染的细胞治疗基础研究

• 批准号: 22K09299
• 负责人: 高木 理彰
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09299/
• 关键词: 人工関節周囲感染; マクロファージ; オートファジー; ネトーシス; 自然免疫

人工関節周囲感染の病態の把握、細胞治療を目的としたアプローチ方法の確立を目的に臨床病理、基礎的な研究を行った。【1】臨床病理的解析感染性人工関節周囲組織PJI、関節リウマチ滑膜組織RA、変形性関節症滑膜組織OAを採取し、電子顕微鏡を用いて微細形態の観察を行った。PJIでは、好中球、単球・マクロファージの形態を示す細胞浸潤が多数認められた。好中球では電子密度の高い顆粒状構造物が観察され、一部の好中球はネトーシスを示す形態変化を呈していた。単球・マクロファージでは、微生物の貪食、破壊組織・細胞片の貪食、オートファゴゾームを主体とするオートファジー構造が観察された。比較対象として用いたOA, RAでは、好中球のネトーシスは観察されず、単球・マクロファージでは、オートファジー様構造物が観察された。オートファジーはRAにおいて、OAよりも高頻度で観察された。免疫組織化学的解析では、オートファジー関連蛋白 WIPI-2が単球・マクロファージ系細胞、線維芽細胞に観察され、その強度は、PJI, RAが同程度で、OAよりも強かった。【2】培養細胞による検討ヒトマクロファージ様細胞株 TPH-1を培養、 PMAでM0マクロファジに誘導後、IFNγ+LPSでM1、IL-4でM2マクロファージを分極誘導した。誘導後、M0マクロファージ（CD11b＋CD80―CD206―）は80%、M1マクロファージ（CD11b＋CD80＋CD206―）は45%、M2マクロファージ（CD11b＋CD80―CD206＋）は4%に分極した。WIPI-2-MFIを検討するとM2マクロファージの方が有意に高かった。上記の検討より、感染性人工関節組織の超微細形態におけるネトーシス、オートファジーの発現が確認され、さらに細胞培養では、細胞を分化誘導して細胞治療に用いるマクロファージのアッセイ系の基礎準備が出来上がった。

进行临床病理和基础研究，目的是了解人工周围关节感染的病理和建立针对细胞疗法的方法。 [1]收集了临床病理分析感染性周期炎组织PJI，类风湿滑膜组织RA和骨关节炎滑膜组织OA的OA，并使用电子显微镜观察了微观形态。 PJI显示大量细胞浸润，显示中性粒细胞，单核细胞和巨噬细胞形态。在嗜中性粒细胞中观察到具有高电子密度的颗粒状结构，一些中性粒细胞表现出表达尚氏病的形态变化。在单核细胞和巨噬细胞中，主要由微生物组成，破坏性组织和细胞碎屑的吞噬作用以及自噬体。在OA中未观察到嗜中性粒细胞病，并用作比较，并且在单核细胞和巨噬细胞中观察到自噬样结构。在RA中，自噬比在OA中观察到的频率更高。在免疫组织化学分析中，在单核细胞/巨噬细胞细胞和成纤维细胞中观察到自噬相关的蛋白WIPI-2，而PJI和RA的强度比OA更强。 [2]使用培养细胞进行检查：培养人类巨噬细胞样细胞系TPH-1，并在诱导PMA，M1和IL-4的M0巨噬细胞后进行了偏振。诱导后，M0巨噬细胞（CD11b + CD80 -CD206-）偏振至80％，M1巨噬细胞（CD11b + CD80 + CD206-）极化为45％，M2巨噬细胞（CD11b + CD80-CD206 +）极化至4％。当检查WIPI-2-MFI时，M2巨噬细胞明显更高。上述研究证实了在传染性人造组织的超细形式中的念珠菌和自噬的表达，在细胞培养中，已经完成了用于通过诱导分化的细胞治疗的巨噬细胞测定系统的基本制剂。

项目成果

Pathologic overview of periprosthetic joint infections. To be or not to be?.

假体周围关节感染的病理学概述。

• 发表时间: 2022
• 作者: 三浦 真弘;内野哲哉;山田茂樹;Takagi M
• 通讯作者: Takagi M

関節リウマチの滑膜におけるマクロファージのサブタイプ別のオートファジー関連タンパク質の解析.

类风湿关节炎滑膜中巨噬细胞亚型自噬相关蛋白的分析。

• 发表时间: 2022
• 作者: 黄漢卿;丸山真博;髙窪祐弥;劉興;宇野智洋;赤羽武;五十嵐貴宏;豊野修二;和根崎禎大;中島拓;髙木 理彰
• 通讯作者: 髙木 理彰