COPD病態におけるオートファジーとガレクチン8の役割の全体像の解明

阐明自噬和半乳糖凝集素 8 在 COPD 病理学中的总体作用

• 批准号: 22K08243
• 负责人: 河野 雄太
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08243/
• 关键词: Galectin-8; オートファージ; 喫煙; マクロファージ; オートファジー

COPD病態の本態は主に喫煙による慢性末梢気道炎症であるが、末梢気道炎症に細胞老化、アポトーシス、下気道感染などが複合的に病態形成に関与する。我々は、喫煙刺激がマクロファージのオートファジーを障害し、ガレクチン8の分泌を誘導することを見出している。実際、ガレクチン8はCOPDの肺で発現が亢進しており、ガレクチン8が気道上皮細胞のIL-6産生や非アポトーシス細胞死を誘導することを確認している。しかし、COPD病態における、ガレクチン8の役割の全体像は十分に解明されていない。本研究は、①喫煙刺激によるオートファジー障害のガレクチン8分泌亢進メカニズム、②ガレクチン8の細胞老化への関与、③ガレクチン8による非アポトーシス細胞死のメカニズムに注目し、ガレクチン8の役割の全体像を解明することを目的としている。2022年度は①の喫煙刺激によるオートファジー障害のガレクチン8分泌亢進メカニズムを中心にPMAでマクロファージ様に分化させたU937細胞(PMA-U937)とタバコ抽出液(CSE)を用いて検討を行った。オートファジーは、細胞外小胞(EV)の分泌に関与されていることが報告されているため、CSEで刺激したPMA-U937の培養上清中に含まれるEVを超遠心法で採取し、解析を行った。EVの分泌量はEV分画のCD63の発現やナノトラッキング法を用いて検証したが、EVの分泌はCSEの濃度依存性に亢進した。また、EV内にガレクチン8が存在することが確認したが、高濃度のCSEでは、EV内のガレクチン8はむしろ減少した。今後、EV以外の経路も、オートファジーと小胞輸送に注目し検証していく予定である。

COPD的主要原因是吸烟引起的慢性外周气道炎症，但周围气道炎症涉及细胞衰老，凋亡和下呼吸道感染，并结合发病机理。我们发现吸烟刺激会损害巨噬细胞自噬，并诱导乳肠蛋白8分泌。实际上，在COPD的肺中，半乳糖素8增加，证实了甲状腺蛋白8在气道上皮细胞中诱导IL-6产生和非凋亡细胞死亡。然而，尚未完全了解Galectin 8在COPD病理学中的作用的总体情况。这项研究旨在通过重点关注1）由吸烟刺激引起的自噬疾病的机制来阐明甲乳素8的总体作用，2）2）乳糖蛋白8参与细胞衰减，以及3）非胃痛细胞死亡的机制，乙氏蛋白8的机制是通过2022年提高了galectin的机制，我们调查了galectin的机制，我们研究了galectin的机制8，我们研究了galectin的机制。 U937细胞（PMA-U937）和烟草提取物（CSE）以巨噬细胞的方式通过PMA分化。由于据报道自噬参与了细胞外囊泡（EV）的分泌，因此通过超速离心进行了CSE刺激的PMA-U937培养上清液中包含的EV，并通过超速离心进行分析并进行分析。使用CD63在eV级分和纳米折磨方法中验证了EV分泌的量，但以浓度依赖性CSE的方式增加了EV分泌。此外，已经证实了EV中存在Galectin 8，但是在高浓度的CSE中，EV中的Galectin 8实际上降低了。将来，我们计划检查除电动汽车以外的其他途径，重点是自噬和囊泡运输。