Group A Streptococcus glycoproteins evade immune defense mechanisms

A 组链球菌糖蛋白逃避免疫防御机制

基本信息

批准号：
22K08605
负责人：
井坂雅徳
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

A群連鎖球菌は、劇症型と呼ばれる敗血症性ショックを引き起こす原因菌である。この劇症型に至る原因は、いまだに解明されていない。劇症型への発症機序を探るため病理組織を観察すると、この細菌が表皮と真皮の間に留まり移動しないこと、好中球などの免疫細胞が患部へ浸潤せず働いていないことが先行研究により明らかとなっている。好中球の患部への浸潤には、好中球膜上の糖鎖CD162と血管内皮細胞上の糖鎖結合タンパク質セレクチンとの接着と相互作用が必須である。我々はこの点に着目し、劇症型株の培養上清から好中球浸潤を抑制する糖タンパク質を新たに見出した。新たに見出した糖タンパク質の立体構造や機能は未知である。そこで本研究はA群連鎖球菌が分泌する糖タンパク質のセレクチン阻害による免疫回避機構を解明する。この研究を解析するために、まず糖タンパク質の糖鎖構造の全容を明らかにする。そのために、今年度は劇症型A群連鎖球菌培養上清に発現する糖タンパク質の精製及びその条件検討を実施した。劇症型として分離された臨床分離株１５２９及びゲノム株SF370株の培養上清より、硫安沈澱法、透析、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィーを実施した。その結果、培養上清より陽イオン交換クロマトグラフィーで最終精製を行うことで、糖鎖結合タンパク質の分子量に相当したタンパク質が精製できることが確認できた。今後この精製方法によりタンパク質を量的に確保して糖タンパク質の糖鎖切断を実施しようと試みている。

A组链球菌是引起败血性休克的致病细菌，称为暴发型。这种暴发性类型的原因尚未澄清。在观察病理组织以探索发展暴发形式的机制时，先前的研究表明，这种细菌不会保持表皮和真皮之间，并且免疫细胞（如中性粒细胞）不会渗透并在受影响的地区起作用。中性粒细胞浸润到受影响区域需要在血管内皮细胞上的中性粒细胞膜上聚糖CD162与聚糖结合蛋白选择素之间的粘附和相互作用。我们专注于这一点，并发现了新的糖蛋白，这些糖蛋白抑制了暴性菌株培养上清液中嗜中性粒细胞的浸润。新发现的糖蛋白的结构和功能尚不清楚。因此，这项研究通过抑制A组链球菌分泌的糖蛋白选择素来阐明免疫逃避机制。为了分析这项研究，我们首先阐明了糖蛋白的糖基化结构的全部程度。为此，今年我们进行了在暴发组A组链球菌及其条件的培养上清液中表达的糖蛋白纯化。硫酸铵沉淀，透析，离子交换色谱和亲和色谱法是从临床分离株1529和基因组菌株SF370的培养上清液中进行的，这些菌株被分离为暴发形式。结果，已经证实，阳离子交换色谱法培养上清液的最终纯化允许纯化与糖基化蛋白分子量相对应的蛋白质。将来，我们正在尝试使用这种纯化方法来确保蛋白质的定量蛋白质来执行糖蛋白的糖基化。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

GALAXY ver3: updated web application for glycosylation profiling based on 3D HPLC map

GALAXY ver3：更新了基于 3D HPLC 图谱的糖基化分析 Web 应用程序

DOI：
10.1093/glycob/cwac025
发表时间：
2022
期刊：
Glycobiology
影响因子：
4.3
作者：
Yagi Hirokazu;Amagasa Eijiro;Shiota Masaaki;Yamada Issaku;Aoki-Kinoshita Kiyoko F;Kato Koichi
通讯作者：
Kato Koichi

A greater effect on clarithromycin resistance of mef associated msr than mef associated msr in Streptococcus pyogenes

在化脓性链球菌中，mef 相关 msr 对克拉霉素耐药性的影响大于 mef 相关 msr