CMTM family proteins regulate PD-L1 exosome secretion and anti-tumor immunity

CMTM家族蛋白调节PD-L1外泌体分泌和抗肿瘤免疫

基本信息

批准号：
22K08263
负责人：
前門戸任
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

免疫チェックポイント阻害剤(ICI)の登場によって非小細胞肺癌（NSCLC）の治療成績が飛躍的に改善している。ニボルマブ等の投与により劇的な治療効果を示す症例もあるが、奏効率は20％程度に留まる。一方、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤はNSCLCに対する優れた治療薬であるが、耐性が課題である。最近になって、4回膜貫通分子CMTM6が免疫チェックポイントPD-L1の発現を制御することが明らかになった。申請者は肺癌由来エクソソームがCMTM7に制御される知見を得た。本研究では、「CMTM6およびCMTM7がエクソソーム形成を通して治療抵抗性を誘導している」という仮説を立て、その検証を行う。我々は肺癌細胞株のCMTMの発現を他癌腫細胞株を比較しながら評価した結果、肺癌細胞株ではCMTM6およびCMTM7で発現が高いことが分かった。その後の研究をCMTM6とCMTM7にフォーカスしていくことになった。H1975肺癌細胞株とii-18肺癌細胞株にCMTM6およぶCMTM7をトランスフェクトし安定的にCMTMを発現できる細胞株を樹立した。それぞれのCMTMの働きをみるためにshRNAコンストラクトを作成を試みている。また、CMTM,EGFR、PD-L1の追跡を容易にするためNanoLuc 標識ベクターの作成にも取り組んでいる。これらのベクター細胞の樹立によりin vitroで効率的にCMTMの働きによる変化をみることができるようになる。超遠心を用いてエクソソームの検出についても検証中である。

免疫检查点抑制剂（ICIs）的出现极大地改善了非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗效果。尽管某些病例通过使用纳武单抗等药物显示出显着的治疗效果，但有效率仍保持在 20% 左右。另一方面，EGFR酪氨酸激酶抑制剂是非小细胞肺癌的优秀治疗药物，但耐药性是一个问题。最近，研究发现四跨膜分子CMTM6调节免疫检查点PD-L1的表达。申请人获得了来自肺癌的外泌体受CMTM7调节的知识。在本研究中，我们假设CMTM6和CMTM7通过外泌体形成诱导治疗耐药，我们将验证这一假设。我们通过与其他癌细胞系比较来评估肺癌细胞系中CMTM的表达，发现CMTM6和CMTM7在肺癌细胞系中高表达。之后，我决定将研究重点放在CMTM6和CMTM7上。我们用CMTM6和CMTM7转染H1975肺癌细胞系和II-18肺癌细胞系，建立能够稳定表达CMTM的细胞系。我们正在尝试创建 shRNA 构建体来了解每个 CMTM 的功能。我们还致力于创建 NanoLuc 标记的载体，以促进 CMTM、EGFR 和 PD-L1 的追踪。通过建立这些载体细胞，可以在体外有效地观察CMTM作用引起的变化。我们还正在使用超速离心验证外泌体的检测。