The cell identification research of bone marrow drived liver repaired cell in the new liver regeneration therapy

新型肝再生疗法中骨髓驱动的肝修复细胞的细胞鉴定研究

基本信息

批准号：
22K08057
负责人：
山本直樹
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

iPS細胞由来間葉系幹細胞(iMSC)をGAN食モデルマウスに脾臓投与と静脈投与を行い、投与後の肝組織を浮遊切片法による高感度免疫電顕法とFEI社製の透過型電子顕微鏡Tecnai12BTと走査型電子顕微鏡Qunta3D FEG DualBeamシステムを用いて投与したiMSCの特徴と動態を解析した。また肝組織でのSirius Red染色での肝線維化評価とH-E染色とオイルレッド染色で肝脂肪沈着評価を行った。その結果、脾臓投与の方が肝線維化抑制効果と肝脂肪抑制効果を認めた。また我々が開発した肝脂肪化悪化モデル(AK3KOマウス)とMMP9発現細胞標識トランスジェニック(MMP9/LacZ-DsRed Tg)マウスにGAN特殊飼料食投与することでMAFLDモデルを作成し、肝線維化あるいは脂肪化環境下でこのモデル内部の肝細胞や星細胞等の変化を電子顕微鏡等で評価を開始し、このMAFLDモデルにiMSCを脾臓投与あるいは静脈投与し、線維化・脂肪化抑制効果の評価と動態解析を行った。またiMSCの培養液よりエクソソームを生成し、そのエクソソームをGAN特殊飼料食モデルマウスから連続静脈投与を行い、肝線維化と肝脂肪化の抑制効果を評価した。また新規開発した代謝系異常のAK5KOマウスを作成して、GFPTGからのGFP陽性骨髄細胞あるいはGFP陽性骨髄由来間葉系細胞(MSC)を投与し、肝臓内での投与した細胞の動態と機能解析を行った。

IMSC的特征和动力学用IPS衍生的间质干细胞（IMSC）通过脾和静脉内分析GAN饮食模型小鼠的特征和动力学，并使用高度敏感的Immunoelectron使用浮动型aelectron a Electron Microspope and Electron scan scan tecnii and teecnii scan and teecnii scan tecnii scan and teecnii s tecnii scan and tecnii s tecnii s tecnii s tecni and teec22显微镜Quanta3d FEG双梁系统。此外，用肝组织上的天狼星红染色评估了肝纤维化，并通过H-E染色和油红色染色评估了肝脂肪沉积。结果，脾脏给药在抑制肝纤维化和肝脂肪抑制作用方面显示出更大的有效性。我们还通过为肝脏脂肪脂肪变质模型（AK3KO小鼠）和表达MMP9表达细胞标记的转基因（MMP9/LACZ-DSRED TG）的MMP9小鼠来创建MAFLD模型，我们开发了我们的肝脏纤维化或脂肪纤维环境，我们开始使用MIRS MIRMET sTHERATAIS，我们开始使用Heapatocystysty，并在我们开发的细胞中，并在我们开发的细胞中，并稳定了脂肪的变化。将脾脏或静脉注射给MAFLD模型，并评估纤维化和脂肪抑制和动力学分析的影响。另外，从IMSC培养基中产生外泌体，并从GAN特殊饮食模型小鼠中连续静脉内给予外泌体，以评估肝纤维化和肝脂肪的抑制作用。此外，还创建了新开发的具有代谢异常的AK5KO小鼠，并从GFPTG中施用了GFP阳性髓样细胞或GFP阳性髓样间充质细胞（MSC），并进行了动力学和功能分析。