Combination of T cell receptor gene therapy and immune checkpoint blockade

T细胞受体基因治疗与免疫检查点阻断相结合

• 批准号: 22K08052
• 负责人: 中河 秀俊
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2027-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08052/
• 关键词: TCR-T; 免疫療法; がん免疫; 肝細胞癌; AFP; TERT; MRP3; TCR遺伝子治療

当該年度の本研究の目的は大きく二つに分けられ、一つ目は肝がん抗原特異的免疫反応の制御を詳細に解析することであった。具体的には、TCRseq-RNAseqを用いて特定の遺伝子の役割を解明し、それを制御することでより効果的なTCR-T（T細胞受容体変換T細胞）作製を目指した。本研究では、肝癌特異的なTCR 18種を用いて、それらがpeptide load系の標的細胞に対してどの程度の細胞傷害活性を示すかを検証した。その結果、18種のうち10種のTCRが有効な細胞傷害活性を示すことが確認できた。さらに、この細胞傷害活性が肝がん細胞に対しても同様に機能するか検証するため、HepG2細胞に対する細胞傷害活性を測定した。その結果、TERT特異的TCR 2種、MRP3特異的TCR 1種、AFP特異的TCR 1種の候補が選ばれた。次に、これらの候補をを用いてTCR-Tを作成し、肝がんゼノグラフト細胞株に対する細胞傷害活性を検証したところ、TERT特異的TCR 1種、MRP3特異的TCR 1種が選ばれた。一方、AFP特異的TCRについては有効な細胞傷害活性が示されず、さらなる検討が必要と考えられた。目的2では、肝がん薬物療法における免疫反応の意義と効果予測の試みとして、Atezo/Bev療法を受けたHLA-A24陽性の患者について、治療前後の肝癌由来エピトープペプチドに対する免疫応答をIFNgELISpotアッセイで検証した。32例の比較解析から、免疫誘導された群とされなかった群とで生存中央値が456日と169日となり、免疫誘導された群で生存期間が長い傾向が見られた。

今年这项研究的目的大致分为两个部分，第一部分是详细分析肝癌抗原特异性免疫反应的调节。具体来说，我们使用TCRseq-RNAseq来阐明特定基因的作用，并通过控制它们，我们的目标是创造更有效的TCR-T（T细胞受体转化的T细胞）。在这项研究中，我们使用了 18 种肝癌特异性 TCR 来检查它们对肽负载系统的靶细胞表现出细胞毒活性的程度。结果，证实18个TCR中有10个表现出有效的细胞毒活性。另外，为了验证该细胞毒活性对于肝癌细胞是否具有同样的作用，测定了对于HepG2细胞的细胞毒活性。结果，选择了两种TERT特异性TCR候选物、一种MRP3特异性TCR和一种AFP特异性TCR。接下来，使用这些候选物创建TCR-T，并验证它们对肝癌异种移植细胞系的细胞毒活性，并选择一种TERT特异性TCR和一种MRP3特异性TCR。另一方面，AFP特异性TCR没有表现出任何有效的细胞毒活性，因此认为有必要进一步研究。在目标2中，为了预测免疫反应在肝癌药物治疗中的意义和功效，我们使用IFNgELISpot测定来测量HLA-A24阳性患者治疗前后对肝癌衍生表位肽的免疫反应接受 Atezo/Bev 治疗的人。 32例病例对比分析显示，免疫诱导组和非免疫诱导组的中位生存期分别为456天和169天，其中免疫诱导组的生存期往往更长。