Study of APOBEC3 family involved in early tumorigenesis of EB virus-infected epithelial cells.

APOBEC3家族参与EB病毒感染上皮细胞早期肿瘤发生的研究。

• 批准号: 22K07101
• 负责人: 飯笹 久
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07101/
• 关键词: Epstein-Barr virus; APOBEC; ミトコンドリア; Epstein-Barr ウイルス; 核酸修飾; EBV関連胃癌; APOBEC3

Epstein-Barrウイルス（EBV）は、成人の大部分が感染している普遍的なウイルスであるが、Bリンパ腫や、EBV関連胃がん（胃がんの約10%）、上咽頭がん等の発生に関わっている。 APOBEC3(A3)ファミリーは、ヒトでは７つの遺伝子が存在し、DNAのシチジンをウリジンへ変換するDNA編集酵素である。A3ファミリーの発現は、主にI型インターフェロン（IFN）により誘導され、増殖が盛んなウイルスゲノムに変異を導入して複製を阻害する。また、宿主ゲノムやミトコンドリアゲノムへ変異を導入する可能性も、指摘されている。EBV関連胃がんは、A3ファミリーを高発現している。しかし、核に局在し宿主ゲノムに変異を挿入するA3Bの活性は、EBVのウイルスタンパク質BORF2により抑制される。一方、細胞質に局在するA3の腫瘍化における役割は明らかにされていない。即ち、A3がEBV関連上皮系腫瘍の発生を抑制するのか促進するのかは、いまだ見解が分かれている。応募者は、EBVの感染によって、胃上皮細胞でDNA編集酵素A3ファミリーの発現が誘導され、それに伴いミトコンドリアゲノムの変異が導かれることを発見した。A3ファミリーのうち、A3A, A3Cの過剰発現がミトコンドリアゲノムの変異を誘導したが、その活性はA3Cのほうが強かった。このため、A3Cの発現量を正確にモニタリングし、高発現細胞株を分離する実験系の確立をおこなうと共に、ウイルス感染後の経時的なミトコンドリアゲノムの変異と、A3Cタンパク質発現量を測定した。その結果、両者はウイルス感染後24時間まで経時的に増加していた。次にA3C-eGFP融合タンパク質を用いて細胞内局在を解析すると、A3Cは主にミトコンドリアに局在していた。現在、相同組換えベクター作成と共に、A3C欠損株を作成し、ウイルス感染後ミトコンドリア変異の変化を調べている。

EB 病毒 (EBV) 是一种普遍存在的病毒，可感染大多数成年人，但它与 B 淋巴瘤、EBV 相关胃癌（约占胃癌的 10%）和鼻咽癌的发生有关。 APOBEC3 (A3) 家族包括人类中的七个基因，是一种 DNA 编辑酶，可将 DNA 中的胞苷转化为尿苷。 A3 家族的表达主要由 I 型干扰素 (IFN) 诱导，该干扰素通过在快速增殖的病毒基因组中引入突变来抑制复制。还指出了将突变引入宿主基因组或线粒体基因组的可能性。 EBV相关胃癌高表达A3家族。然而，位于细胞核中并将突变插入宿主基因组的 A3B 的活性受到 EBV 病毒蛋白 BORF2 的抑制。另一方面，定位于细胞质的A3在肿瘤发生中的作用尚未阐明。也就是说，关于A3是否抑制或促进EBV相关上皮肿瘤的发展，意见仍然存在分歧。申请人发现EBV感染诱导胃上皮细胞中DNA编辑酶A3家族的表达，导致线粒体基因组突变。在A3家族成员中，A3A和A3C的过度表达会诱导线粒体基因组突变，但A3C的活性更强。为此，我们建立了一个实验系统来准确监测A3C表达并分离高表达细胞系，并测量病毒感染后随时间变化的线粒体基因组突变和A3C蛋白表达。因此，在病毒感染后 24 小时内，这两种水平都会随着时间的推移而增加。接下来，当我们使用A3C-eGFP融合蛋白分析细胞内定位时，我们发现A3C主要定位于线粒体中。目前，我们正在创建同源重组载体并创建A3C缺陷株，以研究病毒感染后线粒体突变的变化。

项目成果

ピロリ菌はIV型分泌機構を介してウイルス受容体の発現を誘導し、EBウイルス感染を促進する

幽门螺杆菌通过IV型分泌机制诱导病毒受体表达，促进EBV感染

• 发表时间: 2022
• 作者: 飯笹 久;Fatimah Afifah;Moe Thin Myat;岡田俊平;小野村大地;赤田純子;山岡吉生;吉山裕規
• 通讯作者: 吉山裕規

Zeocin, a bleomycin analog, induces EBV-specific cell death of gastric cancer cells.

Zeocin 是一种博莱霉素类似物，可诱导胃癌细胞的 EBV 特异性细胞死亡。

• 发表时间: 2022
• 作者: Aung Phyo Wai;Hisashi Iizasa;Yuxin Liu;Daichi Onomura;Shunpei Okada;Hironori Yoshiyama
• 通讯作者: Hironori Yoshiyama