条件的不死化細胞株を用いた血液―胎盤関門の胎児解毒機構と薬物間相互作用の解析

使用条件永生化细胞系分析胎儿解毒机制和血胎盘屏障的药物相互作用

• 批准号: 14771343
• 负责人: 飯笹 久
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771343/
• 关键词: 血液-胎盤関門; DHEA-S; 条件的不死化細胞株; P-glycoprotein; oatp2; TR-TBT; OAT4; RST; ABCP

温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラットに由来する合胞体栄養細胞株TR-TBTを用いて、血液-胎盤関門における胎児老廃物の輸送活性を調べた。その結果、TR-TBTには胎児副腎から産生されるDehydroepiandrosteron-3-sulfate(DHEA-S)のbasal側からの取込み活性があり、その活性は、organic anion transporter(OAT)の基質とorganic anion transporting polypeptide(OATP)の基質により抑制された。更に、TR-TBTには、DHEA-Sを基質とするoatp2,3,4ならびにOAT-K2が発現し、oatp2特異的阻害剤であるdigoxinによりDHEA-Sの取込みは部分的に抑制されたことから、胎児側からのDHEA-Sの取込みには、oatp2,3,4とOAT-K2が使われていることが、予想された。次に、TR-TBTからのDHEA-Sならびにその代謝産物の排出を調べるために、P-glycoprotein特異的阻害剤とABCP特異的阻害剤を用いて、TR-TBTからのDHEA-Sの排出活性を調べた。その結果、これら阻害剤はそれぞれ排出活性を抑制したことから、血液-胎盤関門による胎盤からのDHEA-Sもしくはその代謝産物の排出には、P-glycoproteinならびにABCPが使われていることが、予想された。現在、より詳細な解析を行っている。

温度敏感性SV40T抗彩色的营养简介大鼠源自大鼠的大鼠TR-TBT检查了胎儿屏障处的胎儿废物的运输​​活性。结果，TR-TBT具有脱氢双凝胶-3-硫酸盐（DHEA-S）的活性，其活性是有机阴离子转运蛋白（OAT）。此外，TRBT含有基于DHEA-S的OATP2、3、4和OAT-K2，而DHEA-S已被Degoxin（一种OATP2特异性抑制剂）部分抑制。 K2用于从胎儿捕获DHEA-S。接下来，为了检查DHEA-S从TR-TBT和代谢产物的排放，使用P-糖蛋白特异性抑制剂和ABCP特异性抑制剂使用了TRBT的DHEA-S发射活性。结果，由于这些抑制剂中的每一个都抑制了排放活性，因此预计P-糖蛋白和ABCP可用于通过血液 - 静脉屏障从胎盘中发射DHEA-S或代谢物。目前，我们正在进行更详细的分析。

项目成果

Iizasa H et al.: "Altered expression and function of P-glycoprotein in dextran sodium sulfate-induced colitis in mice."Journal of Pharmaceutical Science. 92(3). 569-576 (2003)

Iizasa H 等人：“葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎中 P-糖蛋白的表达和功能发生改变。”《药物科学杂志》。

Kitano T, Iizasa H et al.: "Conditionally immortalized syncytiotrophoblast cell lines as new tools for study of the blood-placenta barrier."Biological & Pharmaceutical Bulletin. (in press).

Kitano T、Iizasa H 等人：“有条件永生化合体滋养层细胞系作为研究血胎盘屏障的新工具。”

Asashima T, Iizasa H et al.: "Rat brain pericyte cell lines expressing beta2-adrenergic receptor, angiotensin II receptor type1A, Klotho, and CXCR4 mRNA despite having endothelial cell markers."Journal of Cellular Physiology. 197(1). 69-76 (2003)

Asashima T、Iizasa H 等人：“尽管具有内皮细胞标记，但大鼠脑周细胞系仍表达 β2-肾上腺素能受体、血管紧张素 II 受体 1A 型、Klotho 和 CXCR4 mRNA。”细胞生理学杂志。

Kitano T, Iizasa H et al.: "Polarized glucose transporters and mRNA expression properties in newly developed rat syncytiotrophoblast cell lines, TR-TBTs"Journal of Cellular Physiology. 193(2). 208-218 (2002)

Kitano T、Iizasa H 等人：“新开发的大鼠合体滋养层细胞系 TR-TBT 中的极化葡萄糖转运蛋白和 mRNA 表达特性”细胞生理学杂志。

Kondo T, Hosoya K, Hori S, Tomi M, Ohtsuki, S, Tanakaga H, Nakashima E, Iizasa H et al.: "Establishment of conditionally immortalized rat retinal pericyte cell lines (TR-rPCT) and their application in a co-culture system using retinal capillary endothelia

Kondo T、Hosoya K、Hori S、Tomi M、Ohtsuki, S、Tanakaga H、Nakashima E、Iizasa H 等人：“条件永生化大鼠视网膜周细胞系 (TR-rPCT) 的建立及其在共-