Research of developing a novel liver-friendly treatment for tuberculosis using natural compounds

使用天然化合物开发新型肝脏友好型结核病治疗方法的研究

基本信息

批准号：
22K06693
负责人：
森茂太郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06693/
关键词：
天然化合物リファンピシン抗結核菌活性 tanshinones 結核薬物性肝障害

项目摘要

リファンピシンの抗結核菌活性を増強する効果を持つ化合物を同定するため, ３つの天然化合物ライブラリー (合計3,232化合物, 一部重複あり) を用いてスクリーニングを行った。具体的には, 7H9液体培地に天然化合物のみを50μMの終濃度で加えた条件と, 天然化合物とリファンピシン (0.02μg/mL; 最小発育阻止濃度の1/3量) を合わせて加えた条件で結核菌H37Rv株の培養を行い, 抗結核菌活性を示す化合物の探索を行った。その結果, 50μMの濃度でH37Rv株に対して抗結核菌活性を示す天然化合物が406個見出された。一方, 単独 (50μM) では抗結核菌活性を示さなかったが, リファンピシンと併用した場合にH37Rv株に対する抗結核菌活性が認められた化合物を107個同定した。これら107個の化合物は, リファンピシンの抗菌活性を増強していると考えられた。また, 抗結核薬による肝細胞障害を軽減する天然化合物を見出すため, ヒト肝癌由来細胞であるHepG2細胞を用いたスクリーニング系の確立を進めた。さらに, これまでに抗結核菌活性やリファンピシンとの併用効果を明らかにしているtanshinonesの構造類縁体であるTetrahydro tanshinone Iについて抗結核菌活性などの解析を行った。その結果, Tetrahydro tanshinone Iは他のtanshinonesと同様にH37Rv株に加えて, イソニアジド耐性結核菌やリファンピシン耐性結核菌に対しても抗結核菌活性を示すことを明らかにした。また, Tetrahydro tanshinone Iはリファンピシンとの相加効果が認められた。

为了鉴定增强利福平抗结核活性的化合物，我们使用三个天然化合物库（总共 3,232 种化合物，有些重叠）进行了筛选。具体而言，将天然化合物单独添加至7H9液体培养基中，终浓度为50μM，并将天然化合物和利福平(0.02μg/mL；最低抑菌浓度的1/3)一起添加，培养结核分枝杆菌。 H37Rv 菌株并寻找具有抗结核活性的化合物。结果，发现 406 种天然化合物在 50 μM 浓度下对 H37Rv 菌株表现出抗结核活性。另一方面，我们鉴定了 107 种化合物，它们在单独使用（50 μM）时没有显示出抗结核活性，但在与利福平联合使用时显示出针对 H37Rv 菌株的抗结核活性。这 107 种化合物被认为可以增强利福平的抗菌活性。此外，为了找到减轻抗结核药物引起的肝细胞损伤的天然化合物，我们着手建立了使用HepG2细胞（源自人类肝癌的细胞）的筛选系统。此外，我们还分析了四氢丹参酮 I 的抗结核活性，四氢丹参酮 I 是丹参酮的结构类似物，其与利福平联合使用的抗结核活性和功效已得到证实。结果显示，四氢丹参酮I与其他丹参酮一样，除了对H37Rv菌株外，还对耐异烟肼结核分枝杆菌和耐利福平结核分枝杆菌表现出抗结核活性。此外，还观察到四氢丹参酮I与利福平的相加作用。