Biochemical and physiological studies on deubiquitinating enzymes based on an analysis of the enzymatic activity dynamics

基于酶活性动力学分析的去泛素化酶的生化和生理学研究

• 批准号: 23310160
• 负责人: HATTORI Akira
• 金额: $ 12.81万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23310160/
• 关键词: ユビキチン; 脱ユビキチン化酵素; activity-based probe; 活性制御; 酸化ストレス; プローブ; ユビキチン様ドメイン; プロテアーゼ; アクティビティーベースドプローブ; プロテオミクス解析; activety-based probe

Post-translational modification of cellular proteins by ubiquitin (Ub) is involved in various aspects of cell physiology, such as protein degradation via proteasome, DNA repair, and membrane trafficking. Deubiqutinating enzymes liberate a Ub moiety from polyUb chains attached on substrate proteins. In the current study, we investigated novel research tools for the enzymatic characterization of deubiquitinating enzymes. Ub-granzyme B (Ub-GrB), an N-terminal Ub fusion mature granzyme B was expressed in a baculovirus system. By employing Ub-GrB, we showed that human ubiquitin specific protease 47 is active. In addition, we explored oxidative stress-sensitive deubiquitinating enzymes, and found that ubiquitin C-terminal hydrolase-L3 is susceptible to reactive oxygen species by utilizing a Ub activity-based probe, Ub-vinyl sulfone.

泛素 (Ub) 对细胞蛋白质的翻译后修饰涉及细胞生理学的各个方面，例如通过蛋白酶体进行的蛋白质降解、DNA 修复和膜运输。去泛素化酶从附着在底物蛋白上的多聚泛素链中释放泛素部分。在当前的研究中，我们研究了用于去泛素化酶的酶学表征的新研究工具。 Ub-颗粒酶 B (Ub-GrB) 是一种 N 端 Ub 融合成熟颗粒酶 B，在杆状病毒系统中表达。通过使用 Ub-GrB，我们证明人类泛素特异性蛋白酶 47 具有活性。此外，我们探索了氧化应激敏感的去泛素化酶，并通过利用基于 Ub 活性的探针 Ub-乙烯基砜，发现泛素 C 末端水解酶-L3 对活性氧敏感。

项目成果

C7orf24/gamma-glutamyl cyclotransferase as a molecular target for cancer chemotherapy

C7orf24/γ-谷氨酰环转移酶作为癌症化疗的分子靶点

• 发表时间: 2012
• 作者: Ohno Y; Hattori A; & Kakeya H
• 通讯作者: & Kakeya H

脱ユビキチン化酵素(USP)47の分子内ドメインの機能解析

去泛素化酶 (USP) 47 分子内结构域的功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 青木 豊; 朴 錦花; 小林 万祐子; 服部 明; 掛谷 秀昭
• 通讯作者: 掛谷 秀昭

グランザイムB をレポーターに用いた脱ユビキチン化酵素活性測定法の構築

以颗粒酶B为报告基因测定去泛素化酶活性的方法构建

• 发表时间: 2011
• 作者: 服部明; 朴 錦花; 田代亜衣香; 森吉英子; 掛谷秀昭
• 通讯作者: 掛谷秀昭

New insights into the role of aminopeptidases in the treatment for both preeclampsia and preterm labor

关于氨肽酶在先兆子痫和早产治疗中作用的新见解

• DOI: 10.1517/13543784.2013.825248
• 发表时间: 2013
• 作者: Mizutani S; Tsunemi T; Mizutani E; Hattori A; Tsujimoto M; & Kobayashi H
• 通讯作者: & Kobayashi H

Enzymatic properties of recombinant human ubiquitin specific protease 47

重组人泛素特异性蛋白酶 47 的酶学特性

• 发表时间: 2012
• 作者: 朴 錦花