Mycelial factory for production of biopharmaceuticals using synthetic biology

利用合成生物学生产生物药品的菌丝体工厂

基本信息

批准号：
21K18224
负责人：
本田与一
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

高額なバイオ医薬品を、進化的にユニークな真核生物である事かがわかってきた担子菌(きのこの仲間)を利用して効率的に生産するためのシステム作りを目指す研究です。具体的には、ヒト型の糖鎖修飾酵素遺伝子を担子菌に人工的に導入し、培養後に発現誘導をかけることで、休止菌体を用いてヒト型糖鎖修飾された組換えタンパク質の生産を行います。研究が成功すれば、動物ウィルスの混入のないヒト型タンパク質を製造する技術が確立され、ガンやウィルスに対する抗体療法などを安心安全かつ安価に提供可能になることが期待されます。高マンノース型以降の修飾系をもたないという真核生物の共通祖先に通じると考えられるユニークな糖鎖修飾系を持つ事がわかった担子菌を用いて、ヒト型の糖鎖修飾系を合成生物学的な手法により導入して、休止菌体によるヒト型糖タンパク質の生産システム構築を目指します。このようにして生産されたヒト型糖タンパク質は、安価で安全なバイオ医薬品として活用されることが期待される。子嚢菌類とは進化的に異なるグループに属する担子菌を新たな産業用微生物として利用していく分野を開拓することが目標です。咋年度は、小胞体、ゴルジ体相当物、分泌小胞などのタンパク質分泌系を構成する様々な細胞内小器官に局在すると予想される複数のタンパク質と蛍光タンパク質の融合タンパク質を組換えにより作成し、ヒラタケに形質転換して、それぞれの分泌系細胞内小器官の局在について調べました。今年度は、ゴルジ体のうち初期および後期ゴルジ体に相当する器官に局在すると考えられるタンパク質を用いてさらに解析を進めました。一方で、基盤技術として必要なヒラタケにおけるゲノム編集技術の改善を進めました。

这项研究旨在创建一个系统，用于使用基本科（Kinoko的家庭）有效生产昂贵的生物药物，该系统已经了解了它们是否在进化上是独特的真核生物。具体而言，人为地引入了人型聚糖改性酶基因，并且在培养后，使用静息细菌产生了人型聚糖改性的重组蛋白。如果研究成功，希望技术能够确定免受动物病毒污染的人类蛋白质的生产，并且可以为癌症和病毒提供安全且廉价的解决方案。使用基本菌具有，发现它具有独特的糖基化系统，该系统被认为与真核生物的共同祖先有关，真核生物的共同祖先没有从高甘露糖类型开始的修改系统，我们旨在使用人型糖基化系统使用合成的生物学方法来构建人类糖基化的方法来构建人类型模型，以构建人类gy-type glycods。预计以这种方式生产的人糖蛋白将被用作廉价且安全的生物药物。目的是开发一个领域，其中属于与子cmycetes的群体不同的群体被用作新的工业微生物。在这一年中，预计将构成组成蛋白质分泌系统的各种细胞内细胞器的多种蛋白质和荧光蛋白的融合蛋白，例如内质网，高尔基等效物，分泌囊泡和分泌囊泡被重新产生并转化为Rofish和Synecription nectular of Armistal Interalliuntal Intracelliunt of Arcellult of Arcellular incellult incellultal incellult。今年，使用蛋白质进行了进一步的分析，这些蛋白质被认为与早期和晚期高尔基体相对应的器官定位。另一方面，我们在改善日本百合鱼的基因组编辑技术方面取得了进展，这是基本技术所必需的。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Trans-nuclei CRISPR/Cas9 for safe genome editing technology in Pleurotus ostreatus

平菇安全基因组编辑技术的跨核 CRISPR/Cas9

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Daishiro Koshi;Junko Sugano;Moriyuki Kawauchi;Takehito Nakazawa;Masahiro Sakamoto;Minji Oh;〇Yoichi Honda
通讯作者：
〇Yoichi Honda

Marker-free genome editing in the edible mushroom, Pleurotus ostreatus, using transient expression of genes required for CRISPR/Cas9 and for selection

DOI：
10.1186/s10086-022-02033-6
发表时间：
2022-12-01
期刊：
JOURNAL OF WOOD SCIENCE
影响因子：
2.9
作者：
Koshi, Daishiro;Ueshima, Hiroki;Honda, Yoichi
通讯作者：
Honda, Yoichi

Gene targeting of dikaryotic <i>Pleurotus ostreatus</i> nuclei using the CRISPR/Cas9 system

使用 CRISPR/Cas9 系统对双核平菇细胞核进行基因打靶

DOI：
10.1093/femsle/fnac083
发表时间：
2022
期刊：
FEMS Microbiology Letters
影响因子：
2.1
作者：
Yamasaki Fuga;Nakazawa Takehito;Oh Minji;Bao Dapeng;Kawauchi Moriyuki;Sakamoto Masahiro;Honda Yoichi
通讯作者：
Honda Yoichi

ゲノム工学を用いた白色腐朽菌の科学と新たな可能性

利用基因组工程研究白腐真菌的科学和新可能性

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Nakazawa Takehito;Inoue Chikako;Nguyen Dong Xuan;Kawauchi Moriyuki;Sakamoto Masahiro;Honda Yoichi;Yoichi Honda;本田与一
通讯作者：
本田与一

CRISPR/Cas9 Technology in Mushrooms for Sustainable Future of the Planet and Human Health

蘑菇中的 CRISPR/Cas9 技术促进地球和人类健康的可持续未来

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Nakazawa Takehito;Inoue Chikako;Nguyen Dong Xuan;Kawauchi Moriyuki;Sakamoto Masahiro;Honda Yoichi;Yoichi Honda
通讯作者：
Yoichi Honda