微細構造からエボラウイルスの複製機構を解明する

从精细结构阐明埃博拉病毒的复制机制

基本信息

批准号：
18J01631
负责人：
高松由基
金额：
$ 5.99万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

エボラウイルスの複製機構を微細構造から解明するために、二つの研究の柱を準備した。一つ目は、エボラウイルスの転写促進因子であるウイルスタンパク質VP30のリン酸化に注目して転写・複製制御機構を解明することであり、二つ目は、転写・複製の鋳型となるヌクレオカプシドの形成機構と輸送過程を微細構造から解明することであった。一つ目の研究課題について、本研究でエボラウイルスの増殖におけるVP30をリン酸化するキナーゼを同定し、新しい抗ウイルス薬開発の基盤を構築することができた (Takamatsu, et al. mBio. 2020)。二つ目の研究課題については、前駆研究で構築したエボラウイルスの非感染性ライブセルイメージングシステムを応用し、ヌクレオカプシド様構造の輸送を担うウイルスタンパク質のドメインを同定し、輸送に関わる宿主因子を同定する基盤を構築した (Takamatsu, et al. J.Virol. 2020)。さらに他の高病原性ウイルスに、このシステムを応用し、マールブルグウイルスとラッサウイルスのウイルスタンパク質複合体の輸送経路を解明する非感染性ライブセルイメージングシステムを構築した(Takamatsu, et al. Virol. J. 2019, Takamatsu, et al. Microscopy. 2019)。以上のように複数の国際誌に報告できるようなデータを得たと共に、今後の研究課題である細胞内の移動経路の全体像を視覚化する準備を整えることができた。こうした研究成果・研究姿勢が評価され、採用期間の中途ではあったが、国立感染症研究所の高病原性ウイルス研究部門の主任研究官（任期なし）に抜擢して頂いた。新天地においても、本研究計画で構築した病原体の宿主細胞内での挙動を視覚化するライブイメージングシステムを発展させたいと考えている。

为了从精细结构上阐明埃博拉病毒的复制机制，我们准备了两大研究支柱。第一个是通过关注病毒蛋白VP30（埃博拉病毒的转录启动子）的磷酸化来阐明转录/复制控制机制，第二个是阐明核衣壳的形成，核衣壳充当转录和复制的模板。目的是从精细结构中阐明机制和运输过程。关于第一个研究课题，在这项研究中，我们能够鉴定出在埃博拉病毒增殖过程中磷酸化 VP30 的激酶，并能够为开发新的抗病毒药物奠定基础（Takamatsu, et al. mBio. 2020）。关于第二个研究课题，我们将应用前期研究中构建的埃博拉病毒非感染性活细胞成像系统来识别负责核衣壳样结构运输的病毒蛋白的结构域，并识别参与运输的宿主因子。（Takamatsu 等人，J.Virol.2020）。此外，我们将该系统应用于其他高致病性病毒，并构建了非感染性活细胞成像系统，以阐明马尔堡病毒和拉沙病毒的病毒蛋白复合物的转运途径（Takamatsu, et al. Virol. J . 2019, Takamatsu）等。2019）。如上所述，我们已经获得了可以在多个国际期刊上报道的数据，现在我们已经准备好可视化细胞内迁移路线的整体图景，这是未来的研究课题。这些研究成果和研究态度得到了高度评价，虽然我正处于任职中期，但我还是被选为国立感染症研究所高致病性病毒研究室的首席研究员（无固定任期）。在新领域，我们希望开发本研究项目中构建的实时成像系统，以可视化宿主细胞内病原体的行为。