Visualization analysis of neurotransmission and exocytosis by using novel fluorescent protein and laser optics technology

利用新型荧光蛋白和激光光学技术对神经传递和胞吐作用进行可视化分析

• 批准号: 22300131
• 负责人: NEMOTO Tomomi
• 金额: $ 11.48万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22300131/
• 关键词: 2光子顕微鏡; 分泌; 蛍光タンパク質; SNARE; 光脳科学; 非線形光学; 開口放出; イメージング; 2光子顕微鏡強; 破骨細胞; SNAREタンパク質

We have developed novel visualization analysis techniques for neurotransmission and exocytosis, and constructed “in vivo” optical imaging methods to advance for elucidation of the molecular basis. We generated fluorescently tagged SNARE proteins, VAMP-Sirius by using a novel fluorescent protein Sirius in order to visualize dynamics of acid vesicles in an osteoclast model. A novel FRET Ca^<2+> sensor, Cameleon-nano protein, visualized Ca^<2+>-dependent exocyosis in pancreatic acinar cells, as well as Ca^<2+> dynamics in neurons in cerebellum. Furthermore, we successfully observed hippocampal neurons in deeper layers in live mouse brains.

我们开发了用于神经传递和胞吐作用的新型可视化分析技术，并构建了“体内”光学成像方法来推进分子基础的阐明。我们通过使用新型荧光蛋白 Sirius 生成了荧光标记的 SNARE 蛋白 VAMP-Sirius，以便可视化破骨细胞模型中酸囊泡的动力学一种新型FRET Ca^2+传感器，Cameleon-纳米蛋白，可视化Ca^2+依赖性胞吐作用。胰腺腺泡细胞中的Ca^2+动态以及小脑神经元中的Ca^2+动态。此外，我们成功地观察了活体小鼠大脑更深层的海马神经元。

项目成果

ベクトルビームによるレーザー顕微鏡の超解像化の試み

利用矢量光束进行激光显微镜超分辨率的尝试

• 发表时间: 2013
• 作者: 日比輝正

生体深 部を可視化する in vivo 多光子励起顕微鏡法

体内多光子激发显微镜可视化活生物体的深层部分

• 发表时间: 2012
• 作者: 川上良介;日比輝正;根本知己
• 通讯作者: 根本知己

生体深部の二光子イメージング-その深部化と高解像化の試み-

生物体深层的双光子成像 - 尝试增加深度并提高分辨率 -

• 发表时间: 2012
• 作者: 日比輝正;川上良介;根本知己
• 通讯作者: 根本知己

ニューロフォトニクスのための多光子顕微鏡技術の基礎と展開

神经光子学多光子显微镜技术的基础和发展

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本知己

2光子蛍光イメージング

2 光子荧光成像

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本知己