マラリア高浸淫地域におけるクロロキン耐性インフルエンザウイルス出現と医療への影響

疟疾高发地区出现抗氯喹流感病毒及其对医疗保健的影响

基本信息

批准号：
20659099
负责人：
鈴木宏
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

1. 研究の目的抗マラリア剤のクロロキンは、最近広域スペクトラム抗ウイルス剤として注目され、安価で世界各地で容易に手に入る事から、新型インフルエンザを含むインフルエンザ対策への有用性が注目されている。一方、熱帯、亜熱帯地域のインフルエンザ疫学は不十分であり、マラリアとの診断からクロロキンを使用する可能性は高く、クロロキン耐性インフルエンザウイルス発生は予知されるが、実態は不明である。本研究では、熱帯・亜熱帯地域のみならず日本でのクロロキン耐性季節性インフルエンザウイルスの疫学と発生機序を検討する。2. 方法と結果これまで教室で保存してきた日本、ベトナム、ミャンマーのA型(A/H1N1,A/H3N2)インフルエンザを検査材料とし、ウイルスをMadin-Darby Canine Kidney(MDCK)細胞に接種後クロロキン添加と無添加培養液で培養し、ウイルス感受性をTCID50が2.0以下の際に耐性株と判定した。さらには、耐性株の遺伝子変異の有無を検討した。耐性株はベトナムとミャンマーのA/H1N1はそれぞれ38%、20%、A/H3N2は100%、60%であり、日本でもA/H1N1で17%、A/H3N2で28%であった。これまでの予想を超えて、熱帯でない日本でも自然界に多数のクロロキン耐性株が検出された。現在、ウイルスは東南アジアから北上して日本に来るとされており、我々の結果と併せ、既に世界各地にクロロキン耐性ウイルスが浸淫している可能性が強く示唆された。この発生機序の解明には、ウイルスの8つの遺伝子全体の解析を行ったが、特異な遺伝子変異は見られなかった。クロロキンはウイルスの細胞侵入に際し、エンドソーム内のpHをアルカリに変化させることから、HA遺伝子の細胞融合最適pHについて耐性株とコントロール株に比較し、アルカリ側に推移している新たな機序の可能性が示唆されたが、更なる検討が必要と思われた。

1. 研究目的氯喹是一种抗疟药，作为一种广谱抗病毒药物，最近引起了人们的关注，并且由于其价格便宜且在世界范围内易于获得，因此其在对抗流感（包括新的流感病毒株）方面的作用正在引起人们的关注。注意力。。另一方面，热带、亚热带地区流感流行病学研究不足，诊断疟疾时很可能使用氯喹，虽然预测出现耐氯喹流感病毒，但实际情况未知。在本研究中，我们将研究热带和亚热带地区以及日本的耐氯喹季节性流感病毒的流行病学和爆发机制。 2 方法与结果以教室保存的日本、越南、缅甸甲型流感（A/H1N1、A/H3N2）为试验材料，将病毒接种到 Madin-Darby 犬肾（MDCK）细胞中，然后给予氯喹，在补充和非添加培养基中培养该菌株，当TCID50等于或小于2.0时，确定病毒敏感性为耐药。此外，我们还检查了耐药菌株是否存在基因突变。越南和缅甸对甲型H1N1的耐药株分别为38%和20%，对甲型H3N2的耐药株分别为100%和60%，对日本的甲型H1N1和甲型H3N2的耐药株分别为17%和28%。即使在非热带地区的日本，在自然界中也发现了许多氯喹耐药菌株，数量超出了之前的预期。目前认为该病毒从东南亚向北传播到日本，结合我们的结果，这强烈表明耐氯喹病毒可能已经渗透到世界各地。为了阐明这次爆发背后的机制，我们分析了该病毒的所有八个基因，但没有发现特定的基因突变。当病毒进入细胞时，氯喹将核内体的pH值改变为碱性，因此与耐药菌株和对照菌株相比，HA基因的细胞融合的最佳pH值向碱性侧移动可能涉及一种新的机制。认为有必要。