ブタ未成熟卵の超低温保存に関する研究

未成熟猪蛋超低温保存的研究

基本信息

批准号：
15F15402
负责人：
菊地和弘
金额：
$ 1.09万
依托单位：
National Agriculture and Food Research Organization (2016)国立研究開発法人農業生物資源研究所 (2015)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-11-09 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15F15402/
关键词：
アポトーシスギャップ結合卵丘細胞卵母細胞ブタ

项目摘要

H28年度では、前年度の実験を継続し、卵核胞期の未成熟卵母細胞(卵)ガラス化冷却により、早期の卵核胞崩壊による核成熟を引き起こすこと、通常ではない時期で第二減数分裂期に達することを明らかにした。しかしながら、細胞質成熟について、ATPやグルタチオン(GSH)濃度、さらには卵丘細胞の膨潤化という指標は、核の成熟度あるいはtranszonal projections (TZP)の解離にかかわらず、培養時間に同期していた。また、ガラス化冷却液の処理により、核小体前駆体(nucleolus precursor body)の断片化(小型の核小体前駆体の増数)やF-アクチンの形態変化をもたらしたが、その後の培養を行うことで修復することが明らかになった。ガラス化冷却による、核成熟の早期化が卵の加齢や他のメカニズム（アポトーシスの誘導や細胞質内mRNAの消失）が考えれた。また、目標としていたアポトーシスの発生状況をTUNEL染色、アポトーシス検出キット等により調査した。また、Fura 2AMによる細胞内カルシウムイオンの動態の検出にも着手した。これらの結果については現在解析中である。なお、予定より6ヶ月短縮し、H28年3月末で終了した。

2016年，我们继续进行上一年的实验，并揭示了在OVA核相期间未成熟的卵母细胞（卵）玻璃化冷却导致由于早期的卵形囊泡塌陷而导致的核成熟，并且可以在异常的时期达到第二个减数分裂相。然而，对于细胞质成熟，ATP，谷胱甘肽（GSH）浓度甚至卵高细胞的指标都会与孵育时间同步，无论核成熟度或分区分区投影的解离（TZP）。此外，用玻璃冷却剂处理导致核仁体体的分裂（小核仁前体的数量增加）和F-肌动蛋白形态的变化，但揭示了该产物通过随后的培养来修复。据认为，玻璃化冷却引起的快速核成熟导致卵老化和其他机制（诱导凋亡和胞质内mRNA的丧失）。此外，使用TUNEL染色，凋亡检测试剂盒等研究了凋亡的靶向状态。我们还开始使用Fura Fura 2am检测到细胞内钙离子的动力学。这些结果目前正在分析中。该活动从计划日期开始减少了六个月，并于2016年3月底结束。