生物活性の＂クロスチェック＂が可能な環状ペプチドセンサーの創製

创建能够“交叉检查”生物活性的环肽传感器

基本信息

批准号：
14J09620
负责人：
岡田洋平
金额：
$ 2万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J09620/
关键词：
環状ペプチド液相合成可溶性担体

项目摘要

近年，ペプチドは低分子医薬と抗体医薬の利点を併せ持つ次世代の医薬品候補化合物として大きな注目を集めている．ペプチド創薬においては，インスリンに代表されるペプチドホルモンだけでなく，これまでに機能が明らかとなっているタンパク質の活性フラグメントもまた有力なリード化合物となる．中でも，生物活性を高めるとともに消化酵素に対する耐性を得る上で分子内に架橋構造を導入することが非常に効果的であり，環状ペプチドの設計，合成が広く研究されてきた．しかしながら，活性測定に必要な物質量を供給することは依然として極めて困難であり，さらには活性測定法の構築にも膨大な時間と労力がかけられている．すなわち，コストや生産規模に優れた合成法の確立に加え，限られた物質量で迅速かつ簡便に活性測定を実施することができれば，環状ペプチド創薬のブレイクスルーになることが期待される．このような学術的背景を踏まえ，申請者らは疎水性ベンジルアルコールを可溶性担体として用いる液相ペプチド合成法の研究開発を推進してきた．本法では，担体に結合したペプチドを貧溶媒添加によって選択的に沈殿させることで，カラムクロマトグラフィー等の分離操作を挟まずに多段階の化学変換を実現できる．本研究では申請者らのこれまでの液相ペプチド合成法の技術をさらに発展させ，環状ペプチドの合成に特化させることを目的とした．その結果，本法に電気化学的な手法を組み合わせることで，電子そのものを試薬として効率的にジスルフィド結合含有ペプチドを合成できることが見出された．また，本法を応用することで非天然型架橋を有する環状ペプチドの合成をグラムスケールで達成し，一部のペプチドについては細胞ならびにマウスを用いた活性試験を実施し，リードとなる天然型架橋のものよりも有効であることを明らかにした．

近年来，肽引起了极大的关注，因为下一代药物候选化合物结合了小分子药物和抗体药物的优势。在肽药物发现中，不仅胰岛素等肽激素，而且还揭示了其功能的蛋白质活性片段，这也是显着的铅化合物。其中，在分子中引入交联结构在增加生物学活性和实现对消化酶的耐药性方面非常有效，并且已经对环状肽的设计和合成进行了广泛的研究。但是，提供活动测量所需的物质仍然非常困难，甚至需要大量的时间和精力来建立活动测量方法。换句话说，除了建立成本和生产量表非常出色的合成方法外，我们还可以快速，轻松地进行有限物质的活动测量，预计将是环状肽药物发现的突破。鉴于这一学术背景，申请人一直在促进使用疏水性苄醇作为可溶性载体的液相肽合成方法的研究和开发。在这种方法中，通过选择性地通过添加较差的溶剂来选择性地沉淀与载体结合的肽，可以实现多个化学转化的阶段，而无需分离作战，例如柱色谱。这项研究旨在进一步发展申请人的先前液相肽合成技术，并专门研究环状肽的合成。结果，发现通过将该方法与电化学技术相结合，可以使用电子本身作为试剂有效合成含二硫键的肽。此外，通过应用这种方法，在克尺度上实现了与非自然类型交联的环状肽的合成，并使用细胞和小鼠对某些肽进行了活性测试，表明它们比具有自然型交联导线的肽更有效。