不可逆的糸球体硬化症の進行とその性差の分子メカニズムの解明

阐明不可逆性肾小球硬化进展的分子机制及其性别差异

基本信息

批准号：
24790849
负责人：
岸誠司
金额：
$ 2.75万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24790849/
关键词：
Sox9 糸球体硬化骨芽・軟骨細胞様形質変化性差

项目摘要

本研究では、間葉系細胞由来の糸球体構成細胞が最終的に骨芽・軟骨細胞様形質変化をきたし、不可逆的に腎不全に至る糸球体硬化の分子病態の詳細を明らかとするための検討を行った。我々がこれまでの研究で明らかにしてきた糖尿病性腎症の進展において重要なメサンギウム細胞の細胞外マトリックス産生亢進やメサンギウム細胞の形質変化において中心的な役割を果たすBMP4, Smad1および軟骨発生のマスター遺伝子であるSOX9および関連分子Scleraxisに主として着目した検討を継続した。(1)BMP4刺激下で培養メサンギウム細胞において、Sox9と、Sox9に直接転写制御を受けるH型コラーゲンは発現が誘導されるが、Sox9の内因性のインヒビターであるId2をメサンギウム細胞に強制発現させると、BMP4刺激下で誘導されるSox9およびII型コラーゲンの発現が抑制されることを確認した。(2)糖尿病性腎症モデルマウスでさらにBMP4/smad1-Sox9/Scleraxisシグナルの評価を進めた。STZマウスおよびBMP4ヘテロノックアウトマウスにSTZを投与して糖尿病性腎症を惹起したモデルを作成した。これらモデルマウスでの病理組織学的な変化と、腎機能・蛋白尿などの変化を経時的に評価し、糸球体硬化病変が進展していく過程において、BMP4/Smad1-sox9/Scleraxisのシグナルの活性化がSTZマウスではコントロールと比較して促進されており、逆にBMP4ヘテロノックアウトマウスでは減弱していることを、免疫組織学的解析にて確認した。(3)また、他の腎炎モデルでのSox9/scleraxis発現の検討として自然発症ネフローゼモデルであるICGNマウスにおいても、病変の進展過程で糸球体にSOX)の発現が増強してくることを免疫組織学的に確認した。いずれのモデルにおいても、Sox9はメスに比較して、オスでシグカル分子の発現量が増加していた。

在本研究中，我们旨在阐明肾小球硬化的分子发病机制的细节，其中间充质细胞来源的肾小球细胞最终发生成骨细胞样和软骨细胞样变化，导致不可逆的肾衰竭。我们的研究表明，BMP4、Smad1 和软骨发育的主基因在系膜细胞中细胞外基质的产生增加和系膜细胞的表型变化中发挥着核心作用，这对于糖尿病肾病的发展至关重要。我们继续研究，主要关注 SOX9 和相关分子 Scleraxis。 (1)在BMP4刺激下培养的系膜细胞中，诱导了Sox9和直接受Sox9转录调节的H型胶原的表达，但是当系膜细胞被迫表达Sox9的内源性抑制剂Id2时，证实了BMP4 刺激下诱导的 Sox9 和 II 型胶原的表达受到抑制。 (2)我们进一步评估了糖尿病肾病模型小鼠中的BMP4/smad1-Sox9/Scleraxis信号。我们创建了一个模型，通过给 STZ 小鼠和 BMP4 杂合基因敲除小鼠注射 STZ 来诱导糖尿病肾病。我们评估了这些模型小鼠随时间的组织病理学变化以及肾功能、蛋白尿等的变化，发现BMP4/Smad1-sox9/Scleraxis信号在肾小球硬化病变进展过程中发生变化，免疫组织学分析证实STZ中促进了激活。小鼠与对照组相比，并且在 BMP4 杂合基因敲除小鼠中相反减弱。（3）此外，为了检测Sox9/scleaxis在其他肾炎模型中的表达情况，我们还发现在自发性肾病模型ICGN小鼠中，肾小球中SOX（SOX）的表达在肾小球病变进展过程中增加。免疫系统已被科学证实。在这两种模型中，与女性相比，Sox9 在男性中的信号分子表达增加。