肝星細胞におけるAngII-EGFR-ADAM17シグナル伝達系の解明

阐明肝星状细胞中的 AngII-EGFR-ADAM17 信号系统

• 批准号: 18790251
• 负责人: 及川 浩樹
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790251/
• 关键词: ADAM 17; Angiotensin II; 肝星細胞; Antiotensin II; 肝線維化

腎線維症や動脈硬化の発症においてAngiotensin II(Ang II)-EGFRのクロストークが存在し、ADAM17がこのクロストークで重要な役割を担っていることが示された。そこで、肝線維化を担う肝星細胞(HSC)でも同様な機構が存在するかをLI 90(活性化HSC)を使い検討し、以下の結果を得た。1. Ang II(10-7^M)投与により、5分後にEGFRおよびERK1/2のリン酸化がピークを示すことを認めた。2. AG1478(EGFR inhibitor)、Ormesartan(AT-1 inhibitor)投与により、上記リン酸化は抑制されることが分かった。また、ATP assayにより、HSCの増殖も抑制されることも認めた。しかし、PD 123319(AT-2 inhibitor)では、リン酸化および増殖能の有意な抑制は認められなかった。3. TAPI-1(ADAM 17 inhibitor)でも上記リン酸化および増殖能は抑制された。4. Adenovirusにより、ADAM 17をノックダウンしたが、同様に上記リン酸化および増殖能は抑制された。5. PCRにより、EGFRリガンドのmRNAの発現を検討すると、HB-EGF、amphiregulin、TGF-αの発現は認めたが、epiregulin、betacellulinについては、ほとんど発現していないことが分かった。6. Adenovirus vectorにより、ADAM17をノックダウンし、Ang II投与によるHB-EGF、amphireguIin、TGF-αの分泌についてELISAで検討すると、いずれも40〜60%分泌が減少するのを認めた。以上により、Ang-ll-EGFRのクロストークがHSCでも存在し、ADAM17が肝線維症の治療戦略のターゲットになることが示唆された。

血管紧张素II (Ang II)-EGFR串扰存在于肾纤维化和动脉硬化的发展过程中，ADAM17被证明在该串扰中发挥重要作用。因此，我们使用LI 90（活化的HSC）研究了导致肝纤维化的肝星状细胞（HSC）中是否存在类似的机制，并获得了以下结果。 1.给予Ang II（10-7μM）后，EGFR和ERK1/2的磷酸化在5分钟后达到峰值。 2.发现通过给予AG1478(EGFR抑制剂)和奥美沙坦(AT-1抑制剂)抑制上述磷酸化。此外，通过 ATP 测定还观察到 HSC 增殖受到抑制。然而，PD 123319（AT-2 抑制剂）没有观察到磷酸化和增殖能力的显着抑制。 3. TAPI-1（ADAM 17抑制剂）也抑制上述磷酸化和增殖能力。 4. ADAM 17被腺病毒敲低，但上述磷酸化和增殖能力同样受到抑制。 5.通过PCR检测EGFR配体mRNA的表达，发现HB-EGF、双调蛋白和TGF-α有表达，但上皮调节蛋白和β细胞素几乎不表达。 6.当使用腺病毒载体敲除ADAM17并通过ELISA检查给予Ang II后HB-EGF、双调蛋白和TGF-α的分泌时，观察到它们的分泌全部减少40-60%。这些结果表明 Ang-II-EGFR 串扰也存在于 HSC 中，并且 ADAM17 可能成为肝纤维化治疗策略的靶标。