Molecular dissection of species-specific transgene silencing

物种特异性转基因沉默的分子剖析

基本信息

批准号：
23780027
负责人：
MISHIBA Kei-ichiro
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

Molecular mechanism of the 35S promoter-specific DNA methylation in gentian was investigated in this study. Two distinct de novo methylated regions were identified after the methylation analysis of an entire T-DNA segment in transgenic gentian. Both of the regions contain two consensus sequences, to which gentian nuclear extracts could bind, and yeast one-hybrid screening identified candidates for binding to the sequences. Additionally, relationship between DNA methylation and histone modification was investigated using transgenic gentian cell suspension culture, and the results showed that de novo methylation of the 35S region occurred in connection with histone modification. To investigate whether the 35S promoter-specific DNA methylation exists in other plant species, transgenic lettuce plants having 35S promoter were produced. As the result, suppression of the transgene expression and hypermethylation of the 35S promoter region were found in the transgenic lettuce plants.

本研究探讨了龙胆35S启动子特异性DNA甲基化的分子机制。对转基因龙胆中整个 T-DNA 片段进行甲基化分析后，鉴定出两个不同的从头甲基化区域。这两个区域都包含两个共有序列，龙胆核提取物可以与其结合，并且酵母单杂交筛选鉴定了与这些序列结合的候选序列。此外，利用转基因龙胆细胞悬浮培养物研究了DNA甲基化与组蛋白修饰之间的关系，结果表明35S区的从头甲基化与组蛋白修饰有关。为了研究35S启动子特异性DNA甲基化是否存在于其他植物物种中，产生了具有35S启动子的转基因生菜植物。结果，在转基因生菜植物中发现了转基因表达的抑制和35S启动子区域的高甲基化。

项目成果

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专利数量（0）

An attempt to detect siRNA-mediated genomic DNA modification by artificially induced mismatch siRNA in Arabidopsis.

DOI：
10.1371/journal.pone.0081326
发表时间：
2013
期刊：
PloS one
影响因子：
3.7
作者：
Miyagawa Y;Ogawa J;Iwata Y;Koizumi N;Mishiba K
通讯作者：
Mishiba K

ナス果実で強く発現する遺伝子のプロモーター解析

茄子果实强表达基因的启动子分析

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
藤原知也;平松由季;三柴啓一郎;小泉望
通讯作者：
小泉望

De novo DNA methylation of the 35S enhancer revealed by high-resolution methylation analysis of an entire T-DNA segment in transgenic gentian

转基因龙胆中整个 T-DNA 片段的高分辨率甲基化分析揭示了 35S 增强子的从头 DNA 甲基化

DOI：
10.5511/plantbiotechnology.10.1222a
发表时间：
2011
期刊：
Plant Biotechnology
影响因子：
1.6
作者：
Satoshi Yamasaki;Masayuki Oda;Nozomu Koizumi;Kazuhiko Mitsukuri;Masafumi Johkan;Takashi Nakatsuka;Masahiro Nishihara;Kei-ichiro Mishiba
通讯作者：
Kei-ichiro Mishiba

Making transgenic eggplant with high carotenoids contents.、SOL2011 8th Solanaceae and 2nd Cucurbitaceae Genome Joint Conference

制作高类胡萝卜素转基因茄子，SOL2011第八届茄科、第二届葫芦科基因组联席会议