細胞間コミュニケーションを利用した歯原性細胞分化誘導法の開発

开发利用细胞间通讯诱导牙源细胞分化的方法

基本信息

批准号：
23593013
负责人：
山田亜矢
金额：
$ 3.41万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23593013/
关键词：
再生医療細胞間結合コネキシン43

项目摘要

平成23年度は、歯胚および歯胚由来培養細胞株におけるギャップジャンクション分子の網羅的解析の実施と、既に発現することがわかっている2種類の分子について機能阻害システムを確立するという研究計画であった。上記計画に基づき、準備していたマウスの発生段階における各歯胚サンプルと培養細胞よりmRNAを抽出し、マイクロアレー解析を行う予定にしていたが、大震災による停電と、電源復旧後も漏電の危険性の為、電源再開が大幅に遅れ、これまで構築してきた研究サンプルを失ってしまった。また、大震災の影響で研究室の復旧にも長期間を要した。このことから、研究が大幅に遅れてしまった。平成23年度は、喪失した研究サンプルの再構築を行った。具体的には、cDNAマイクロアレー解析を行うために、マウスの発生段階において、胎生13.5,14.5,16.5,出生後1,3,7日の歯胚サンプルを作製した。培養細胞については、上皮系細胞として、SF2細胞を用いて、神経成長因子の1つであるNT-4を添加し、SF2細胞をアメロブラスチン陽性細胞に分化させた細胞を作製した。また、間葉系細胞としては、mDP細胞を用いて、骨形成因子の1つであるBMP2を添加し、DSPP陽性細胞に分化させた細胞を作製した。今回、東日本大震災特別措置で再応募した基盤研究(B)に移行することができた為、基盤研究(B)にて、このようにして再度作製した研究サンプルを用いて、本研究を継続遂行することとなった。

在2011财年，研究计划是在牙齿胚胎和牙齿衍生的培养细胞中实施间隙连接分子分析，并为已经显示的两种类型的分子建立功能抑制系统。基于上述计划，从每个牙齿胚样品中提取mRNA，并计划在准备小鼠阶段的培养细胞中提取mRNA，并计划了微分析的分析，但是由大东日本地震造成的停电和电力恢复后泄漏的危险。此外，由于东日本大地震，实验室的恢复还花了很长时间。由此，研究已大大延迟。在2011财年，我们重建了丢失的研究样本。具体而言，为了执行cDNA微分析分析，在小鼠出生时产生了出生后13.5、14.5,16.5和1、3和7天的胎儿。至于培养的细胞，NT-4是神经生长因子之一，用作上皮细胞，将SF2细胞分化为阳性细胞的细胞被区分。另外，作为绿叶细胞，使用MDP细胞使用BMP2（骨形成因子之一），以及分化为DSPP阳性细胞的细胞。这次，我们能够转移到基金会研究（B），并将其重新用于大东日本地震的特殊措施，因此我们将使用基金会研究（B）中的研究样本继续进行这项研究决定这样做。