比較ゲノム科学的解析に基づく動植物の新奇プログラム細胞死制御因子の探索と機能解析

基于比较基因组分析的植物和动物中新型程序性细胞死亡调节因子的搜索和功能分析

基本信息

批准号：
17770168
负责人：
賀屋秀隆
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

動物・植物の双方から新奇プログラム細胞死制御因子を探索し,機能解析することを目的に研究をおこない,下記の点を明らかにした.1,AtILP(Arabidopsis thaliana IAP-like protein)の機能比較ゲノム科学的解析より,ヒトのアポトーシス抑制因子IAP(Inhibitor of Apoptosis Protein)の機能的ホモログ候補として単離したシロイヌナズナAtILP1,AtILP2遺伝子は,タバコ培養細胞BY-2において過酸化水素誘導性細胞死を抑制する機能を持つことを明らかにした.さらに,AtILP1,AtILP2とGFP融合蛋白質はBY-2及びシロイヌナズナの核に局在することを明らかにした.これらの結果は,AtILP1,AtILP2が核に局在する新奇プログラム細胞死抑制御因子であることを示唆するものである.2,AtSmac(Arabidopsis thaliana Smac/DIABLO)の機能AtSmac遺伝子は,哺乳類においてIAPと相反する機能を持つSmac/DIABLOの機能的ホモログ候補として,シロイヌナズナより単離した.AtSmac遺伝子の過剰発現により,カビ毒FB-1誘導性細胞死が促進され,防御関連遺伝子や細胞死誘導時の液胞膜崩壊に関わるγVPE遺伝子の発現が上昇することを明らかにした.これらの結果は,AtSmacが新奇プログラム細胞死促進因子であることを示唆するものである.3,HsILP1(Homo sapience IAP-like protein)の機能AtILPのパラログであるHsILP1のアポトーシス抑制メカニズムを解明するためにcaspase-3/7の活性抑制能を調べたところ,これらの活性抑制には関与しないことを明らかにした.この結果は,HsILP1はIAPとは異なる経路でアポトーシス抑制に関与することを示唆するものである.

我们开展了在动物和植物中寻找新型程序性细胞死亡调节因子并分析其功能的研究，阐明了以下几点： 1. AtILP（拟南芥IAP样蛋白）的功能基因组比较科学分析表明，人类细胞凋亡抑制剂 IAP（细胞凋亡抑制剂）研究表明，作为蛋白质（蛋白质）的功能同源候选物分离的拟南芥AtILP1和AtILP2基因具有抑制BY-2培养的烟草细胞中过氧化氢诱导的细胞死亡的功能。我们发现 P-融合蛋白定位于 BY-2 和拟南芥的细胞核中，这些结果表明 AtILP1 和 AtILP2 是定位于细胞核 2 AtSmac（拟南芥）的新型程序性细胞死亡抑制因子。拟南芥AtSmac基因是从拟南芥中分离出来的，作为Smac/DIABLO的候选功能同源物，其功能与哺乳动物中的IAP相反。我们发现诱导细胞死亡后，液泡死亡得到促进，防御相关基因和参与液泡膜塌陷的 γVPE 基因的表达增加。这些结果表明 AtSmac 是一种新型程序性细胞死亡促进因子 3，HsILP1(Homo)。为了阐明 AtILP 的旁系同源物 HsILP1 的凋亡抑制机制，我们研究了抑制 caspase-3/7 活性的能力，发现它不参与抑制这些活性。这些结果表明 HsILP1 参与其中。通过与 IAP 不同的途径抑制细胞凋亡。